Het belangrijkste verschil tussen excitatie- en emissiefilter is dat excitatiefilter belangrijk is bij het verlichten van het object onder het onderzoek van de microscoop, terwijl emissiefilter belangrijk is om de omgeving van het object zo donker mogelijk te houden.
De termen excitatie- en emissiefilters worden voornamelijk gebruikt met betrekking tot de fluorescentiemicroscopie die werkt op basis van optische filters. Er zijn drie componenten in een typisch fluorescentiemicroscopisch instrument: excitatiefilter, dichroïsche bundelsplitser en emissiefilter.
Wat is een excitatiefilter?
Een excitatiefilter is een type optisch glasfilter dat nuttig is bij de selectie van de excitatiegolflengte van licht. Gewoonlijk is het een optisch glas van hoge kwaliteit dat veel wordt gebruikt in fluorescentiemicroscopie en spectroscopische toepassingen waarbij we een golflengte moeten selecteren uit een lichtstraal die afkomstig is van een lichtbron.
Excitatiefilters hebben de neiging om licht met een korte golflengte te selecteren dat afkomstig is van een excitatielichtbron. Dit komt omdat dit type licht energie kan dragen die alleen voldoende is voor de fluorescerende werking van een object dat onder de microscoop wordt onderzocht.
Figuur 01: Onderzoek onder een microscoop in aanwezigheid van fluorescentie
Er zijn twee hoofdtypen excitatiefilterglazen als shortpass-filterglazen en bandpass-filterglazen. Deze twee typen filterglazen verschillen van elkaar door de vorm van kerffilters of diepblokkerende filters die worden gebruikt als emissiefilterglazen. Er kunnen echter ook andere typen excitatiefilterglazen zijn, zoals monochromators, wigprisma's die zijn gekoppeld aan een smalle spleet en holografische diffractieroosters.
Gewoonlijk wordt een excitatiefilterglas geleverd in een pakket met een emissiefilter en een dichroïsche bundelsplitser in een kubus. Daarom kunnen we deze twee glazen samen als een combinatie in de microscoop plaatsen. De dichroïsche bundel heeft de neiging om de golflengte te regelen van het licht dat elk filterglas binnenkomt.
Wat is een emissiefilter?
Een emissiefilter is een type optisch glas dat de golflengten die door de fluorofoor worden uitgezonden er doorheen laat gaan. Dit optische glas wordt ook wel een emitter of barrièrefilter genoemd. Het wordt een barrièrefilter genoemd omdat het al het ongewenste licht kan blokkeren buiten de band van excitatie-energie die afkomstig is van het excitatielicht. Dit barrièrefilter zorgt ervoor dat de achtergrond van het object dat onder een microscoop wordt onderzocht, zo donker mogelijk is.
Meestal wordt een emissiefilterglas geleverd in een verpakking met een excitatiefilter en een dichroïsche bundelsplitser in een kubus. Daarom kunnen we deze twee glazen samen als een combinatie in de microscoop plaatsen. Daar heeft de dichroïsche straal de neiging om de golflengte te regelen van het licht dat elk filterglas binnenkomt.
Wat is het verschil tussen excitatie- en emissiefilter?
Er zijn drie componenten in een typisch fluorescentiemicroscopisch instrument dat een excitatiefilter, een dichroïsche bundelsplitser en een emissiefilter omvat. Het belangrijkste verschil tussen excitatie- en emissiefilter is dat excitatiefilter belangrijk is bij het verlichten van het object onder het onderzoek van de microscoop, terwijl emissiefilter belangrijk is om de omgeving van het object zo donker mogelijk te houden.
De onderstaande infographic vat de verschillen tussen excitatie- en emissiefilter in tabelvorm samen.
Samenvatting – Excitatie versus emissiefilter
Het belangrijkste verschil tussen excitatie- en emissiefilter is dat excitatiefilter belangrijk is bij het verlichten van het object onder het onderzoek van de microscoop, terwijl emissiefilter belangrijk is om de omgeving van het object zo donker mogelijk te houden.
