Het belangrijkste verschil tussen RIA en ELISA is dat radioimmunoassay (RIA) een immunoassaytechniek is die radio-isotopen gebruikt om antigeen-antilichaamcomplexen te detecteren, terwijl enzymgekoppelde immunosorbentassay (ELISA) een immunoassaytechniek is die enzymen gebruikt om antigeen te detecteren -antilichaamcomplexen.
Detectie van specifieke eiwitten zoals antigenen is uiterst belangrijk bij de diagnose van ziekten. Daarom zijn RIA en ELISA twee immunoassaytechnieken die in laboratoria worden gebruikt om specifieke eiwitten snel te detecteren, met name antigenen. Over het algemeen bindt een specifiek antilichaam aan het doelantigeen en vormt een zichtbaar complex dat bekend staat als precipitine. Deze antilichaam- en antigeencomplexen kunnen via verschillende technieken worden geïdentificeerd. De techniek om het antigeen-antilichaamcomplex te detecteren met behulp van radio-isotopen staat bekend als RIA, en de techniek om het antigeen-antilichaamcomplex te detecteren met behulp van enzymen staat bekend als ELISA.
Wat is RIA?
Radioimmunoassay (RIA) is een immunoassaytechniek die antigeen- en antilichaamcomplexen detecteert met behulp van radio-isotopen. Rosalyn Sussman Yalow ontwikkelde deze techniek in 1960 met de hulp van Solomon Berson. Voor deze opmerkelijke ontdekking won Rosalyn Sussman Yalow in 1977 de Nobelprijs voor geneeskunde. Meestal wordt bij radio-immunoassay eerst een bekende hoeveelheid van een antigeen radioactief gemaakt. Deze techniek maakt vaak gebruik van gamma-radioactieve isotopen van jodium, 125-I genaamd, om antigenen. Deze radio-isotopen hechten zich normaal gesproken aan het tyrosine-aminozuur van het antigeen. Vervolgens wordt het radioactief gemerkte antigeen gemengd met antilichaam. Als resultaat binden het radioactief gemerkte antigeen en antilichaam specifiek aan elkaar.
Later wordt een serummonster toegevoegd dat een onbekende hoeveelheid van hetzelfde antigeen bevat. Dit zorgt ervoor dat het niet-gelabelde antigeen uit het serum concurreert met het radioactief gemerkte antigeen voor antilichaambindingsplaatsen. Naarmate de concentratie van niet-gelabeld antigeen toeneemt, bindt meer ervan aan het antilichaam, waardoor de radioactief gemerkte variant wordt verdrongen. Het vermindert dus de verhouding van aan antilichaam gebonden radioactief gemerkt antigeen tot vrij radioactief gemerkt antigeen. Aan het einde van de procedure worden de gebonden antigenen afgescheiden. Uiteindelijk wordt de radioactiviteit van vrije antigenen in het resterende supernatant gemeten met behulp van een gammateller.
Wat is ELISA?
ELISA is een immunoassaytechniek die antigeen- en antilichaamcomplexen detecteert met behulp van enzymen. Het is een biochemische analytische test die voor het eerst werd beschreven door Engvall en Perlmann in 1971. In de meeste eenvoudige vormen van ELISA-technieken worden antigenen van het patiëntmonster aan een vast oppervlak gehecht. Vervolgens wordt een bijpassend antilichaam over het oppervlak aangebracht, zodat het aan het antigeen kan binden.
Figuur 01: ELISA
Dit specifieke antilichaam is gekoppeld aan een enzym. Later worden alle ongebonden antilichamen verwijderd door te wassen met wasmiddel. In de laatste stap van deze techniek wordt het substraat van het enzym toegevoegd. Als er een juiste binding van antigeen en antilichaam is, produceert de daaropvolgende reactie een detecteerbaar kleursignaal, meestal een kleurverandering.
Wat zijn de overeenkomsten tussen RIA en ELISA?
- RIA en ELISA zijn immunoassaytechnieken.
- Beide technieken bezitten de vorming van antigeen- en antilichaamcomplexen.
- Deze technieken kunnen worden gebruikt om onbekende eiwitten in monsters te detecteren.
- Ze worden beide gebruikt bij de diagnose van ziekten in laboratoria.
- Beide zijn zeer specifieke en gevoelige technieken.
Wat is het verschil tussen RIA en ELISA?
RIA is een immunoassaytechniek voor de detectie van het antigeen-antilichaamcomplex met behulp van radio-isotopen. ELISA is een immunoassaytechniek voor de detectie van het antigeen-antilichaamcomplex met behulp van enzymen. Dit is dus het belangrijkste verschil tussen RIA en ELISA. Bovendien wordt bij de RIA-techniek het antigeen gelabeld, maar bij ELISA wordt het antilichaam gelabeld. Bovendien zijn labelende moleculen in de RIA-techniek radio-isotopen, terwijl labelende moleculen in ELISA enzymen zijn. Dit is dus een ander verschil tussen RIA en ELISA.
De onderstaande infographic toont meer verschillen tussen RIA en ELISA in tabelvorm.
Samenvatting – RIA vs ELISA
Immunoassays spelen een zeer belangrijke rol in verschillende bioanalytische omgevingen, zoals klinische diagnostiek, biofarmaceutische analyse, milieumonitoring, bioveiligheid en voedseltesten. Sinds de jaren zestig is een breed scala aan immunoassays ontwikkeld. RIA en ELISA zijn beide immunoassaytechnieken. RIA is een immunoassaytechniek voor het detecteren van antigeen-antilichaamcomplexen met behulp van radio-isotopen. ELISA is een immunoassaytechniek voor het detecteren van antigeen-antilichaamcomplexen met behulp van enzymen. Dit is dus de samenvatting van het verschil tussen RIA en ELISA.
