Het belangrijkste verschil tussen Elisa en western blot is dat Elisa of enzymgebonden immunoassay een diagnostisch hulpmiddel is dat detecteert of de patiënt is blootgesteld aan een bepaald type virus of een ander infectieus agens, terwijl western blot een techniek is die detecteert een specifiek eiwit uit een eiwitmonster.
AIDS is een wereldwijd probleem geworden en de incidentie van deze dodelijke ziekte is de afgelopen decennia alarmerend toegenomen. HIV-tests detecteren de aanwezigheid van het humaan immunodeficiëntievirus ((HIV) dat dit syndroom veroorzaakt. Van de verschillende HIV-tests zijn ELISA en Western Blot tegenwoordig erg populair. ELISA staat voor Enzym-Linked Immunosorbent Assay, een op platen gebaseerde testtechniek. Het is een enzym-immunoassay die wordt gebruikt om HIV-antilichamen te detecteren. Western blot detecteert een specifiek eiwit uit een eiwitmengsel door het gebruik van een gelabeld antilichaam.
Belangrijk verschil
1. Overzicht en belangrijkste verschil
2. Wat is een Elisa
3. Wat is een Western Blot
4. Overeenkomsten tussen Elisa en Western Blot
5. Vergelijking zij aan zij - Elisa versus Western Blot in tabelvorm
6. Samenvatting
Wat is Elisa?
ELISA, wat staat voor Enzym-Linked Immunosorbent Assay, was de eerste test die primair was ontworpen voor hiv-detectie. Het is een op platen gebaseerde test. Het wordt gebruikt om HIV-antilichamen te detecteren en deze test vertoont een hoge gevoeligheid. Bij deze techniek binden de antigenen in het monster met de geïmmobiliseerde antilichamen op een vast oppervlak. Eenmaal geïmmobiliseerd, vormen de antigenen complexen met antilichamen gekoppeld aan enzymen. Vervolgens incuberen deze geconjugeerde enzymen met het respectieve substraat.
Figuur 01: ELISA
Enzym-substraatreactie produceert een meetbaar gekleurd product. Door de hoeveelheid van het product te meten, kan het aantal antigenen dat in het monster aanwezig is, worden gekwantificeerd. Daarom is ELISA een zeer specifieke en geavanceerde techniek die de aandacht van goed opgeleide technici vereist. Het is ook een tijdrovend proces waarbij geavanceerde apparatuur vereist is.
Wat is Western Blot?
Western blotting is een techniek die de detectie van een specifiek eiwit uit een eiwitmengsel mogelijk maakt. Western blot is het membraan dat tijdens de blotprocedure wordt gebruikt om het spiegelbeeld van de eiwitpatronen in de SDS-polyacrylamidegel te krijgen. Het membraan dat voor western blotting wordt gebruikt, bestaat meestal uit nitrocellulose of polyvinylideendifluoride (PVDF). Het membraan met het overgedragen eiwit kan worden gebruikt om een bepaald eiwit te identificeren. Voor de detectie van het gewenste eiwit door hybridisatie is een hoogwaardig antilichaam nodig. Het antilichaam bindt aan zijn specifieke antigeen en onthult de aanwezigheid van het gewenste antigeen, dat een eiwit is.
Figuur 02: Western Blot
Overdracht van de eiwitten van de SDS-polyacrylamidegel naar de western blot wordt uitgevoerd door elektroblotting. Het is een effectieve en snelle methode die ervoor zorgt dat de eiwitten uit de gel elektroforese worden en op het nitrocellulosemembraan terechtkomen (western blot).
Western-blotting is nuttig bij de detectie van anti-HIV-antilichamen in het menselijke serummonster. Western blot kan ook worden gebruikt als een bevestigende test voor Hepatitis B-infectie en een definitieve test voor de gekkekoeienziekte.
Wat zijn de overeenkomsten tussen Elisa en Western Blot?
- Elisa en western blot zijn twee soorten technieken die worden gebruikt om hiv te diagnosticeren.
- Beide methoden zijn gebaseerd op immunodetectie.
- Ze zijn gebaseerd op de vorming van het antilichaam-eiwitcomplex.
- Beide methoden kunnen eiwitten analyseren.
- Elisa en western blotting zijn tijdrovende technieken.
- Goed opgeleid en bekwaam personeel is vereist om deze technieken uit te voeren.
Wat is het verschil tussen Elisa en Western Blot?
ELISA is een zeer gevoelige en zeer geavanceerde methode die de aanwezigheid van antigeen en antilichaam in het bloed van de patiënt detecteert, terwijl western blot een techniek is die een specifiek eiwit uit een eiwitmengsel detecteert. Dit is het belangrijkste verschil tussen Elisa en western blot. Elisa is zowel kwalitatief als kwantitatief. Western blot daarentegen is kwalitatief. Soms is het semi-kwantitatief. Als we kijken naar de tijd die nodig is voor de test, is de Elisa-test tijdrovend, terwijl western blot meer tijd in beslag neemt dan Elisa.
De onderstaande infographic vat het verschil tussen Elisa en western blot samen.
Samenvatting – Elisa vs Western Blot
ELISA is een zeer gevoelige en zeer geavanceerde methode die de aanwezigheid van antigeen en antilichaam in ons bloed detecteert. Aan de andere kant wordt een Western-blottechniek ontwikkeld om een specifiek eiwit uit een eiwitmengsel te identificeren. Dit is het belangrijkste verschil tussen Elisa en Western blot. ELISA was de eerste test die werd ontworpen voor de detectie van HIV. Om de resultaten van de ELISA-test te bevestigen, kan Western Blot worden gebruikt. Zowel ELISA als Western Blot worden beschouwd als indirecte methoden voor de detectie van HIV.
