Belangrijk verschil – HPLC versus LCMS
Laten we eerst kijken naar de betekenis van HPLC en LCMS voordat we het verschil tussen HPLC en LCMS analyseren. Chromatografie is een scheidingstechniek in chemische analyse waarbij monsterbestanddelen worden gescheiden tijdens passage door een chromatografisch medium. Het omvat ook interactie met het monster, de stationaire fase en de mobiele fase. HPLC staat voor High Performance Liquid Chromatography en wordt gebruikt als vloeistofchromatografiemethode in de analytische chemie. De combinatie van vloeistofchromatografie en massaspectroscopie (LCMS) is ontwikkeld voor de kwantitatieve analyse van geselecteerde biomoleculen en het is een zeer gevoelige, nauwkeurige en specifieke testprocedure in vergelijking met HPLC. Dit is het belangrijkste verschil tussen HPLC en LCMC. Dit artikel laat u kennismaken met HPLC en LCMC die zich bezighouden met chemische analyse en bespreekt de verschillen tussen HPLC en LCMS.
Wat is HPLC?
High-performance vloeistofchromatografie (HPLC) is een populaire scheidingstechniek in de analytische chemie. Het wordt voornamelijk gebruikt om de componenten te scheiden, om elke component in een mengsel te identificeren en te kwantificeren. Vroeger stond deze methode bekend als hogedrukvloeistofchromatografie omdat het afhankelijk was van pompen om een onder druk staand vloeibaar oplosmiddel dat het monstermengsel omvat, door een kolom te laten stromen die is gevuld met een vast adsorberend materiaal. Elk bestanddeel in het monstermengsel heeft een andere wisselwerking met het vaste adsorberende materiaal, wat resulteert in verschillende stroomsnelheden voor verschillende bestanddelen. Dit kan leiden tot scheiding van de bestanddelen wanneer ze uit de HPLC-kolom stromen.
HPLC is gebruikt voor verschillende toepassingen, zoals analyse van vitamine D-spiegels in bloed, illegaal drugsgebruik van atleten door de medicijnresten in hun urine te detecteren, de bestanddelen van een complex biologisch monster te sorteren voor onderzoeksdoeleinden en analyse en fabricage van geneesmiddelen.
Wat is LCMS?
Vloeistofchromatografie-massaspectrometrie (LCMS) is een analytische techniek die de fysieke scheidingscapaciteiten van vloeistofchromatografie combineert met de massaanalysecapaciteiten van massaspectrometrie (MS). Vloeistofchromatografie is een scheidingstechniek en massaspectrometrie wordt gebruikt om de massa-tot-ladingverhouding van geladen deeltjes te analyseren. De fysieke scheiding wordt meestal bereikt door HPLC en als alternatief, LCMS, ook bekend als HPLC-MS. LCMS is een dominante analytische techniek die een zeer hoge nauwkeurigheid, gevoeligheid en specificiteit heeft in vergelijking met HPLC. Het is dus nuttig in veel toepassingen, zoals onderzoeksdoeleinden, medicijnanalyse, voedselanalyse, enz. LCMS wordt voornamelijk gebruikt om biochemische eigenschappen van een bepaald monster te scheiden, detecteren, identificeren en kwantificeren in de aanwezigheid van complexe chemische mengsels.
Wat is het verschil tussen HPLC en LCMC?
Acroniem en definitie van HPLC en LCMC
HPLC: HPLC staat voor High-Performance Liquid Chromatography. Het is een scheidingstechniek die voornamelijk wordt gebruikt om de componenten te scheiden, om elke component in een mengsel te identificeren en te kwantificeren.
LCMS: LCMS staat voor Liquid Chromatography and Mass Spectrometry. Het is een analytische techniek die de fysieke scheidingscapaciteiten van vloeistofchromatografie combineert met de massaanalysecapaciteiten van massaspectrometrie (MS).
Kenmerken van HPLC en LCMC
Classificatie
HPLC: Dit is alleen een methode voor vloeistofchromatografie.
LCMS: Dit is een combinatie van de vloeistofchromatografiemethode en de massaspectrometriemethode.
Efficiëntie
HPLC: Vergeleken met LCMS is de HPLC-analyse minder efficiënt en langzamer.
LCMS: in vergelijking met HPLC is de LCMS-analyse efficiënt en sneller.
Gevoeligheid
HPLC: Vergeleken met LCMS is de HPLC-analyse minder gevoelig.
LCMS: in vergelijking met HPLC is de LCMS-analyse gevoeliger.
Specificatie
HPLC: In vergelijking met LCMS is de HPLC-analyse minder specifiek.
LCMS: in vergelijking met HPLC is de LCMS-analyse specifieker.
Nauwkeurigheid
HPLC: HPLC geeft minder nauwkeurige resultaten dan LCMS voor de bepaling van sommige chemicaliën.
LCMS: LCMS geeft nauwkeurigere resultaten dan HPLC voor de bepaling van sommige chemicaliën.
Onderdeel
HPLC: HPLC kan worden beschouwd als een onderdeel van LCMS.
LCMS: LCMS kan niet worden beschouwd als een onderdeel van HPLC.
Ionenbron
HPLC: Ionenbron bestaat niet in HPLC-instrument.
LCMS: Ionenbron is aanwezig in LCMS-instrument.
Toepassingen
HPLC: Ionen, polymeren, organische moleculen en biomoleculen kunnen worden geanalyseerd met HPLC.
LCMS: Organische moleculen en biomoleculen kunnen worden geanalyseerd. In tegenstelling tot HPLC kan LCMS worden gebruikt om onvolledig opgeloste mengsels te onderzoeken.
Operatie
HPLC: Het diagram van een HPLC-instrument wordt gegeven in figuur 1 en bevat meestal een autosampler, pompen en een detector. De sampler brengt het monstermengsel in de mobiele fase (onder druk staand mengsel van oplosmiddelen zoals water, acetonitril en/of methanol) die het naar de kolom brengt. De pompen leveren de gewenste stroom en samenstelling van de mobiele fase door de kolom. De kolom is gevuld met het adsorbens, een korrelig vast deeltje zoals silica of polymeren. De detector produceert een signaal dat evenredig is aan de hoeveelheid monsterbestanddelen in de kolom, waardoor een kwantificeerbare analyse van de geselecteerde monsterbestanddelen mogelijk is. Het HPLC-instrument wordt bestuurd en de gegevensanalyse wordt verzorgd door een digitale microprocessor en gebruikerssoftware.
Figuur 1: Schema van HPLC-instrument
LCMS: Het diagram van het LCMS-instrument wordt gegeven in figuur 2. Het monsterextract wordt ingevoegd in de kolom die bestaat uit HPLC. Deze kolom bevat monstermetabolieten op basis van fysieke kenmerken, en verschillende metabolieten stromen met verschillende tijdsintervallen naar de massaspectrometer. Massaspectroscopie wordt gebruikt voor het beoordelen van deeltjesmassa's, voor het bepalen van de elementaire rangschikking van een molecuul en voor het ophelderen van de molecuulstructuren. Het monster moet echter worden geïoniseerd om geladen moleculen te genereren om hun massa-tot-ladingsverhoudingen te bepalen. Daarom bestaat LCMS in plaats van HPLC-instrumenten uit drie extra modules, zoals een ijzerbron, een massa-analysator en een detector. Een ionenbron kan gasfasemonsters omzetten in ionen en een massa-analysator die de ionen groepeert op basis van hun massa met behulp van elektromagnetische velden. Ten slotte kwantificeert een detector de waarden en levert gegevens van elk ion dat in het monster aanwezig is. De LCMS-techniek kan worden gebruikt voor zowel kwalitatieve als kwantitatieve toepassingen.
Figuur 2: Schema van LCMS-instrument
Concluderend, HPLC is een vloeistofchromatografiemethode, terwijl LCMS een combinatie is van vloeistofchromatografie en massaspectrometrie. Beide analysetechnieken hebben verschillende kenmerken, maar ze kunnen worden gebruikt om voedselsamenstellingen, farmaceutische producten en andere bioactieve moleculen te identificeren en te kwantificeren.
