Het belangrijkste verschil tussen CLIA en ECLIA is dat CLIA een chemische methode gebruikt om chemiluminescentie te genereren, terwijl ECLIA een elektrochemische methode gebruikt om chemiluminescentiesignalen te genereren in de immunoassaytechniek.
Immunoassays worden veel gebruikt bij de identificatie en kwantificering van eiwitten die verband houden met ziekten of infecties. Daarom vertrouwen ze voornamelijk op het concept van antilichaam-antigeenbinding. Er zijn veel soorten immunoassays en chemiluminescente immunoassays zijn zo'n opkomende ontwikkelingstechniek. Zowel CLIA als ECLIA gebruiken chemiluminescente indicatoren.
Wat is CLIA?
Chemiluminescente immunoassay (CLIA) is een type immunoassay waarbij een luminescentiemolecuul wordt gebruikt voor detectie. De luminescentie die door het molecuul wordt uitgezonden, wordt gedetecteerd op de spectrofotometer, meestal bij een golflengte tussen 300 - 800 nm. De chemiluminescentie veroorzaakt excitatie van de atomen, en de techniek identificeert exergonische chemische reacties als de meest geschikte energiebron om excitatie te produceren.
De CLIA-techniek vindt plaats in twee hoofdmethoden als directe CLIA-techniek en indirecte CLIA-techniek. De directe CLIA-techniek maakt gebruik van directe luminofoormarkers die aan het doelwit zijn gebonden, terwijl de indirecte CLIA-methode enzymatische markers gebruikt. De directe luminofoormarkers omvatten acidum- en rutheniumesters, terwijl de indirecte markers alkalische fosfatase met adamantyl-1,2-dioxetaanarylfosfaat (AMPPD)-substraat en mierikswortelperoxidase met luminol of zijn derivaten als substraat omvatten.
Figuur 01: Chemiluminescentie
De belangrijkste voordelen van CLIA zijn het brede dynamische bereik van functionaliteit, hoge intensiteit in signaalafgifte, afwezigheid van achtergrondinterferentie, hoge specificiteit, snelheid, stabiliteit en compatibiliteit met verschillende testprotocollen. Daarentegen zijn hun hoge kosten en beperkingen met betrekking tot antigeendetectie en testpanels de nadelen van CLIA.
Wat is ECLIA?
Elektrochemiluminescentie-immunoassay (ELCIA) is een nieuwe techniek voor de ontwikkeling van immunoassays die gebruikmaakt van het concept van elektrochemiluminescentie. In het concept van elektroluminescentie genereren de tussenproducten elektrochemisch. Deze elektronisch gegenereerde tussenproducten bereiken dan een aangeslagen toestand en resulteren in de emissie van licht. De golflengte waarin het licht wordt uitgestraald komt overeen met de energiekloof. Chemiluminescentie wordt dus geproduceerd doordat een of meer reactanten elektrochemisch op de elektrode worden geproduceerd.
ECLIA is een nuttige analytische toepassing met een hoge gevoeligheid en specificiteit. Het wordt voornamelijk gebruikt bij het identificeren van eiwitten die verband houden met verschillende pathologische en medische aandoeningen. De belangrijkste voordelen zijn een groter dynamisch bereik, veelzijdigheid, ruimtelijke en temporele controle door toepassing van elektrodepotentialen, hoge gevoeligheid tot picomolaire bereiken. Het feit dat het een deskundige behandeling vereist en de hoge kosten die ermee gepaard gaan, zijn echter de nadelen.
Wat zijn de overeenkomsten tussen CLIA en ECLIA?
- Beide technieken zijn gebaseerd op het concept van antigeen-antilichaambinding.
- Bovendien worden beide voornamelijk gebruikt voor ziektediagnostiek op basis van eiwitkwantificering.
- Beide zijn gevoelige en specifieke kitmethoden.
- Ze gebruiken het concept van chemiluminescentie voor detectie.
- Ze kunnen worden geautomatiseerd.
- Beide vereisen een spectrofotometer voor detectie.
- Beide hebben een breed dynamisch bereik.
- Het zijn kostbare technieken.
Wat is het verschil tussen CLIA en ECLIA?
CLIA is een techniek van immunoassay die de theorie van chemiluminescentie gebruikt, terwijl ECLIA een techniek van immunoassay is die de theorie van elektrochemie in combinatie met chemiluminescentie gebruikt. Dit is dus het belangrijkste verschil tussen CLIA en ECLIA. Daarom gebruikt CLIA chemische reacties die leiden tot de ontwikkeling van chemiluminescente signalen, terwijl ECLIA elektrochemische reacties gebruikt die leiden tot de ontwikkeling van chemiluminescente signalen.
De onderstaande infographic van het verschil tussen CLIA en ECLIA toont meer vergelijkingen tussen beide technieken.
Samenvatting – CLIA vs ECLIA
CLIA en ECLIA zijn beide technieken die een belangrijke rol spelen bij ziektediagnostiek. Het zijn geavanceerde methoden van immunodiagnostiek op basis van het concept van antilichaam-antigeenbinding. Het belangrijkste verschil tussen CLIA en ECLIA is de methode voor het genereren van chemiluminescentie. Terwijl CLIA chemische reacties gebruikt om chemiluminescentie te genereren na binding van antilichaam en antigeen, gebruikt ECLIA elektrochemische reacties om chemiluminescentie te genereren. Beide technieken zijn echter snel en specifiek.
