Belangrijk verschil – Proteïne A versus Proteïne G
De zuivering van IgG-antilichamen, hun subklassen en andere soorten immunoglobulinen (IgA, IgE, IgD en IgM) zijn vaak uitgevoerd door gebruik te maken van bacteriële eiwitten die een hoge affiniteit hebben voor het Fc-gebied van deze antilichamen. Proteïne A en Proteïne G zijn bacteriële recombinante eiwitten die ten zeerste worden aanbevolen voor de zuivering van de IgG-immunoglobulinen van mensen en andere dieren. En ook proteïne A, proteïne G, proteïne A/G en proteïne L zijn natieve microbiële recombinante proteïnen die specifieke bindingsplaatsen hebben voor het Fc-gebied van zoogdier-IgG-antilichamen. Afgezien daarvan kunnen deze microbiële eiwitten ook worden gebruikt om andere soorten immunoglobuline zoals IgA, IgE, IgD en IgM te zuiveren bij zoogdieren en andere dieren zoals konijnen, muizen, schapen, koeien enz. Proteïne A bindt aan andere menselijke antilichamen dan IgG antilichaam. Maar het bindt zwak met humaan IgG3 subklasse en het is niet bindend met humaan antilichaam IgD. Proteïne G bindt aan alle subtypes van menselijke IgG-antilichamen en het is veelzijdiger wanneer het bindt aan IgG-antilichamen van andere soorten. Proteïne G bindt zich echter niet aan andere typen menselijke antilichamen dan IgG. Proteïne G heeft een hogere affiniteit voor IgG dan proteïne A. Dit is het belangrijkste verschil tussen proteïne A en proteïne G.
Wat is Proteïne A?
Eiwit A wordt gedefinieerd als een oppervlakte-eiwit met een grootte van 42 kDa. Proteïne A komt oorspronkelijk voor in de celwand van Staphylococcus aureus. Het wordt gecodeerd door het "spa"-gen. Proteïne A wordt gereguleerd door DNA-topologie, cellulaire osmolariteit en een tweecomponentensysteem. Dit microbiële recombinante eiwit is zeer betrokken bij de biochemische reacties, vanwege zijn vermogen om te binden met verschillende soorten antilichamen zoals IgG, IgA, IgE en IgM. Dit microbiële eiwit wordt dus gebruikt om menselijke antilichaamtypen te zuiveren. Het heeft vijf homologe "Ig"-bindende domeinen die vouwen in bundels met drie helixen. Elk domein kan binden aan immunoglobuline-eiwitten van veel zoogdiersoorten, met name met IgG-antilichamen. Proteïne A bindt specifiek aan de zware keten van het Fc-gebied van de meeste immunoglobulinen.
Met betrekking tot menselijke eiwitten uit de VH3-familie bindt Proteïne A aan de Fab-regio. Het recombinante proteïne A is breder in zijn vermogen om te binden aan andere menselijke antilichamen (IgA, IgE, IgM) anders dan IgG-antilichaam. Maar het is zwak afwachtend met humaan IgG3 subklasse en het is niet bindend met IgD menselijk antilichaam. Proteïne A kan ook binden aan IgG-antilichamen van andere soorten zoals paard, konijn, muis, hond, aap, koe enz.
Figuur 01: Eiwit A
Eiwit A speelt een cruciale rol in de pathogenese van Staphylococcus aureus. Dit eiwit vergemakkelijkt de binding van bacteriën aan het menselijke met Von-Willebrand-factor gecoate oppervlak. Het verhoogt dus de efficiëntie van bacteriële infecties. Proteïne A verlamt ook de menselijke humorale gemedieerde immuniteit. Dit microbiële recombinante eiwit wordt geproduceerd via het industriële fermentatieproces.
Wat is Proteïne G?
Eiwit G wordt gedefinieerd als het immunoglobuline bindende eiwit dat specifiek tot expressie wordt gebracht door groep C en D streptokokkenbacteriën. Het heeft een hoge affiniteit voor de Fc- en Fab-regio's van de antilichamen. Proteïne G heeft een molecuulgrootte van ongeveer 65 kDa.
Eiwit G is een oppervlakte-eiwit. Vanwege zijn bindingsaffiniteit voor immunoglobulinen wordt het gebruikt voor antilichaamzuivering. Proteïne G bindt aan alle subtypes van menselijke IgG-antilichamen en het is ook veelzijdiger wanneer het bindt aan IgG-antilichamen van andere soorten. Maar het bindt niet aan andere humane antilichaamtypes (IgA, IgE, IgM, IgD). Het vouwen van eiwit G – B1-domeinen met elkaar resulteert in een bolvormig eiwit.
Wat zijn de overeenkomsten tussen proteïne A en proteïne G?
- Beide zijn microbiële eiwitten.
- Beide zijn recombinante eiwitten.
- Beide eiwitten hebben een hoge affiniteit voor humaan IgG-antilichaam en zijn subklassen.
- Beide worden gebruikt voor de zuivering van immunoglobulinen.
- Beide eiwitten kunnen binden aan het Fc-gebied van immunoglobulinen.
Wat is het verschil tussen proteïne A en proteïne G?
Eiwit A versus Proteïne G |
|
| Eiwit A wordt gedefinieerd als een oppervlakte-eiwit van 42 kDa dat oorspronkelijk wordt aangetroffen in de celwand van Staphylococcus aureus. | Eiwit G wordt gedefinieerd als een oppervlakte-immunoglobuline-bindend eiwit met een grootte van 65 kDa dat specifiek tot expressie wordt gebracht door groep C en D streptokokkenbacteriën. |
| Bacteriële type tot expressie brengen | |
| Eiwit A wordt uitgedrukt door Staphylococcus aureus | Eiwit G wordt uitgedrukt door groep C en D streptokokkenbacteriën. |
| Moleculaire grootte | |
| Eiwit A heeft een grootte van 42kDa. | Eiwit G heeft een grootte van ongeveer 65kDa (G148-eiwit G-65kDa en C40-eiwit G-58kDa). |
| Binding aan menselijk serumalbumine | |
| Eiwit A bindt niet aan serumalbumine. | Eiwit G heeft bindingsplaatsen voor serumalbumine. |
| Zuivering van humaan IgG3 Subklasse | |
| Eiwit A kan niet worden gebruikt voor de zuivering van de humane IgG3 subklasse omdat het niet bindt aan de humane IgG3 subklasse immunoglobuline. | Protein G kan worden gebruikt voor de zuivering van de humane IgG3-subklasse omdat het bindt aan de humane IgG3-subklasse immunoglobuline. |
| Zuivering van andere menselijke antilichamen (IgA, IgE en IgM) | |
| Eiwit A heeft een hoger vermogen om te binden aan andere menselijke antilichamen dan IgG-antilichamen. Het kan dus worden gebruikt om andere menselijke antilichamen te zuiveren, zoals; IgA, IgE en IgM. | Eiwit G bindt met alle subtypes van menselijke IgG-antilichamen. Maar proteïne G bindt niet aan andere menselijke antilichamen zoals; IgA, IgE en IgM. Het kan dus niet worden gebruikt om andere menselijke antilichamen te zuiveren, zoals; IgA, IgE en IgM |
Samenvatting – Proteïne A versus Proteïne G
Het microbiële recombinante proteïne A, proteïne G, proteïne A/G en proteïne L zijn natieve bacteriële proteïnen die specifieke bindingsplaatsen hebben voor het Fc-gebied van de zoogdier-IgG-antilichamen. Proteïne A en proteïne G hebben ook bindingsplaatsen voor de andere IgG-antilichamen van andere soorten. Proteïne A en Proteïne G zijn bacteriële recombinante eiwitten die ten zeerste worden aanbevolen voor de zuivering van de IgG-immunoglobulinen van mensen en andere dieren. Proteïne L heeft een hoge affiniteit voor de kappa lichte ketens van de immunoglobulineklassen IgG, IgA en IgM. Proteïne L kan dus worden ingebouwd om deze typen immunoglobuline bij mensen en andere soorten te zuiveren. Industrieel worden al deze bacteriële eiwitten momenteel gebruikt om immunoglobulinen te zuiveren zoals; IgG, IgA, IgD, IgE en IgM. Dit kan worden omschreven als het verschil tussen Proteïne A en Proteïne G.
Download de PDF-versie van Protein A vs Protein G
U kunt de PDF-versie van dit artikel downloaden en gebruiken voor offline doeleinden volgens de citatienota. Download hier de PDF-versie. Verschil tussen proteïne A en proteïne G
