Belangrijk verschil - Immunocytochemie versus immunohistochemie
Immunocytochemie (ICC) en immunohistochemie (IHC) zijn twee veelgebruikte technieken in de moleculaire diagnostiek, die het optreden van zowel niet-overdraagbare als overdraagbare ziekten identificeren en bevestigen op basis van de moleculaire markers die op cellen aanwezig zijn. Het belangrijkste verschil immunocytochemie en immunohistochemie is het molecuul dat wordt gebruikt als de analyseprocedure in deze technieken. In ICC worden primaire en secundaire antilichamen geconjugeerd met markers zoals fluorescentie, terwijl IHC, monoklonale en polyklonale antilichamen worden gebruikt voor de diagnostische bepalingen.
Wat is immunocytochemie (ICC)?
ICC gebruikt primaire en secundaire antilichamen die zijn gebonden aan markers zoals fluorescerende markers of enzymen en is een krachtige detectiemethode om antigenen te detecteren die aanwezig zijn op doelcellen, dit kunnen infectieuze cellulaire deeltjes of kankerachtige tumorcellen zijn. Er zijn drie soorten controles vereist voor immunocytochemie.
- Primair antilichaam – controle die de specificiteit van de binding van het primaire antilichaam aan het antigeen laat zien
- Secundair antilichaam – controle die laat zien dat het label specifiek is voor het primaire antilichaam
- Labelcontroles – laat zien dat de etikettering het resultaat is van het toegevoegde etiket en niet het resultaat van endogene etikettering.
Figuur 01: Immunocytochemie labelt individuele eiwitten in cellen (hier worden tyrosinehydroxylase in de axonen van sympathische autonome neuronen groen weergegeven).
De primaire antilichaamcontrole is specifiek voor elk nieuw antilichaam en kan niet voor elk experiment worden herhaald. De secundaire antilichaamcontrole is ontworpen op basis van het primaire antilichaam dat in het experiment wordt gebruikt en wordt bij elk experiment meegeleverd. De labelingcontrole is inbegrepen als een voorwaarde van de procedure wordt gewijzigd, het monster wordt gewijzigd of wanneer onverwachte labeling wordt gevonden.
De twee belangrijkste toepassingen van ICC zijn Radio Immuno – Assay (RIA) en Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Het meest gebruikte antilichaam is het immunoglobuline G.
Wat is immunohistochemie (IHC)?
In de immunohistochemie bevat het bronmonster monoklonale en polyklonale antilichamen om de aanwezigheid van antigenen in vreemde cellen te bepalen. Deze techniek is gebaseerd op de specifieke reactie van antigeen-antilichaambinding. De antilichamen die bij de detectie worden gebruikt, kunnen worden gelabeld met verschillende markers; het kunnen fluorescentiemarkers, radioactief gemerkte markers of chemische markers zijn. Door in vitro binding tussen het antigeen en het beoogde antilichaam te vergemakkelijken, kan de aan- of afwezigheid van een bepaald eiwit van een cel worden bepaald.
Figuur 02: Immunohistochemische kleuring van normale nier met CD10
Momenteel zijn wetenschappers betrokken bij het ontwikkelen van doelwitantilichamen voor specifieke antigenen die aanwezig zijn in cellen die zich ofwel kunnen ontwikkelen als kwaadaardige tumorcellen of antigenen die aanwezig zijn in infectieuze agentia zoals HIV.
Wat zijn de overeenkomsten tussen immunocytochemie en immunohistochemie?
- Reacties zijn zeer specifiek en nauwkeurig in ICC en IHC.
- De toepassingen van ICC en IHC omvatten diagnostiek van kanker en infectieziekten.
- Steriele omstandigheden moeten in beide omstandigheden worden gehandhaafd en ze moeten in vitro worden uitgevoerd
- Beide technieken leveren reproduceerbare resultaten op.
- Beide zijn snel.
- Radio-labeling, fluorescentietechnieken worden gebruikt als detectiemethoden in zowel ICC als IHC.
- Beide zijn gebaseerd op antigeen-antilichaam-koppeling.
Wat is het verschil tussen immunocytochemie en immunohistochemie?
Immunocytochemie (ICC) versus immunohistochemie (IHC) |
|
| ICC maakt gebruik van aan primaire en secundaire antilichamen gebonden markers zoals fluorescerende markers of enzymen en is een krachtige detectiemethode om antigenen te detecteren die aanwezig zijn op doelcellen. | IHC is een methode die monoklonale en polyklonale antilichamen gebruikt om de aanwezigheid van antigenen te bepalen, dit zijn speciale eiwitmarkers die op de celoppervlakken worden geplaatst. |
| Voorbeeldbron | |
| Monsters afkomstig van weefsels die histologisch zijn verwerkt tot dunne coupes, worden gebruikt in ICC. | IHC gebruikt monsters die bestaan uit cellen die in een monolaag zijn gekweekt of cellen in suspensie die op een objectglaasje worden afgezet. |
| Monsterverwerking | |
| In ICC moeten cellen permeabel zijn om de penetratie van antilichamen naar de intracellulaire doelen te vergemakkelijken. | In IHC zijn cellen formaline-gefixeerd, in paraffine ingebed voordat ze worden gekleurd. |
Samenvatting – Immunocytochemie versus immunohistochemie
Moleculaire diagnostiek wordt gebruikt om het voorkomen van zowel niet-overdraagbare ziekten als overdraagbare ziekten te identificeren en te bevestigen op basis van de moleculaire markers die op cellen aanwezig zijn. Moleculaire markers kunnen eiwitten of sequenties van DNA of RNA zijn; de ontwikkeling van technologieën zoals ICC en IHC hebben de weg vrijgemaakt voor wetenschappers om de ziekte en de oorzaak ervan in een vroeg stadium te identificeren. Zowel ICC als IHC zijn afhankelijk van de specifieke reacties tussen antilichaam en antigeen, hoewel de monsterbron. Het belangrijkste verschil tussen immunocytochemie en immunohistochemie is de monsterverwerking van de twee procedures.
Download PDF-versie van immunocytochemie versus immunohistochemie
U kunt de PDF-versie van dit artikel downloaden en gebruiken voor offline doeleinden volgens de citatienota. Download hier de PDF-versie. Verschil tussen immunocytochemie en immunohistochemie.
