Belangrijk verschil – TLC versus HPTLC
TLC en HPTLC zijn twee chemische technieken die worden gebruikt om niet-vluchtige componenten in een mengsel te scheiden. Het belangrijkste verschil tussen TLC en HPTLC is dat het absorberende materiaal in de TLC-plaat grote deeltjes heeft, terwijl HPTLC-platen zeer kleine deeltjes adsorberend materiaal hebben.
TLC is dunnelaagchromatografie. HPTLC is hoogwaardige dunnelaagchromatografie, wat een geavanceerde techniek is in vergelijking met de TLC-methode.
Wat is TLC?
TLC of dunnelaagchromatografie is een chemische basistechniek die wordt gebruikt om niet-vluchtige componenten in een mengsel te scheiden. Dit experiment wordt uitgevoerd met behulp van glas, plastic of papier. Deze plaat is bedekt met een dunne laag cellulose of silicagel (een adsorberend materiaal). Deze dunne laag staat bekend als de stationaire fase van TLC. Het blad staat bekend als de TLC-plaat.
Voorafgaand aan het experiment worden een basislijn en een bovenlijn gemarkeerd met een potlood op de TLC-plaat. Vervolgens wordt het monster langs deze lijn gespot met behulp van een capillair buisje. Daarna wordt de TLC-plaat verticaal in een mobiele fase geplaatst. De mobiele fase is een oplosmiddel (of een mengsel van oplosmiddelen) dat in een container wordt geplaatst. Bij het plaatsen van de TLC-plaat in deze mobiele fase moet de basislijn over de marge van het oplosmiddel worden gehouden. Anders wordt het monster opgelost in het oplosmiddel.
TLC-plaat mag nog enige tijd in de mobiele fase blijven. Dan, na verloop van tijd, stijgt de mobiele fase naar boven op de plaat als gevolg van capillaire werking. Als het monster oplosbaar is in de mobiele fase, zal het samen met de mobiele fase naar boven stijgen.
Het "like lost like"-principe zit achter deze TLC-methode. Dit betekent dat polaire verbindingen oplossen in polaire oplosmiddelen, terwijl niet-polaire verbindingen oplossen in niet-polaire oplosmiddelen. De stationaire fase is meestal silicagel of cellulose, wat een polaire verbinding is. De gebruikte mobiele fase is een niet-polair oplosmiddel zoals hexaan. Daarom, als het monster niet-polaire componenten bevat, zullen deze componenten samen met de mobiele fase naar boven migreren. Polaire componenten blijven aan de plaat plakken. Onder de bewegende componenten zullen matig niet-polaire verbindingen langzaam migreren, terwijl zeer niet-polaire verbindingen snel zullen migreren. Wanneer het oplosmiddelfront de bovenste lijn van de TLC-plaat heeft bereikt, wordt de plaat eruit gehaald en gedroogd.
Figuur 01: TLC-techniek
Als de componenten in het monster gekleurde verbindingen waren, zouden er op verschillende locaties kleurrijke vlekken op de plaat moeten zijn. Maar als de componenten kleurloos waren, zouden andere technieken moeten worden gebruikt; bijvoorbeeld ninhydrine sproeien om ammoniak of aminen (primaire aminen en secundaire aminen) te detecteren.
Wat is HPTLC?
HPTLC of high performance dunnelaagchromatografie is de geavanceerde vorm van dunnelaagchromatografie (TLC). De resolutie en de nauwkeurigheid van HPTLC zijn zeer hoog. De meeste stappen van deze techniek kunnen worden geautomatiseerd.
De platen die in HPTLC worden gebruikt, bevatten silicageldeeltjes met een zeer kleine afmeting en de pakkingsdichtheid van de gel op de plaat is hoog. Het oppervlak van de plaat is glad en zorgt voor een efficiënte scheiding. De analyse is sneller dan de TLC-techniek. De gevoeligheid van deze methode is ook hoog. In HPTLC kunnen verschillende monsters in dezelfde plaat worden gescheiden zonder enige monstervoorbereidingsstap.
Wat is het verschil tussen TLC en HPTLC?
TLC versus HPTLC |
|
| TLC is dunnelaagchromatografie. | HPTLC is hoogwaardige dunnelaagchromatografie. |
| Techniek | |
| Het is een chemische basistechniek die wordt gebruikt om niet-vluchtige componenten in een mengsel te scheiden. | Het is de geavanceerde vorm van dunnelaagchromatografie (TLC). |
| Plaat | |
| TLC-plaat kan gemaakt zijn van papier, plastic of glas dat is aangebracht met een adsorberend materiaal met grote deeltjes. | HPTLC-platen hebben zeer kleine deeltjes adsorberend materiaal. |
| Resolutie | |
| TLC-methode geeft een slechte resolutie wanneer het monster componenten heeft met vergelijkbare eigenschappen. | HPTLC-methode geeft een hoge resolutie. |
| Tijd | |
| TLC-techniek is een tijdrovende techniek. | HPTLC geeft resultaten met een hogere snelheid dan de TLC-methode. |
Samenvatting – TLC versus HPTLC
HPTLC is de geavanceerde vorm van TLC. Het belangrijkste verschil tussen TLC en HPTLC is dat de TLC-plaat kan worden gemaakt van papier, plastic of glas dat is aangebracht met een adsorberend materiaal met grote deeltjes, terwijl HPTLC-platen zeer kleine deeltjes adsorberend materiaal hebben.
