Belangrijk verschil - Inenting versus incubatie
Micro-organismen worden gekweekt in laboratoria en industrieën voor verschillende doeleinden, zoals karakterisering, differentiatie, identificatie, ontwikkeling van antibiotica, ontwikkeling van vaccins, productie van transgene (GGO) planten en dieren en extractie van organische zuren. Ze worden gekweekt in kunstmatig gesynthetiseerde groeimedia of in natuurlijke substraten. Daarom moeten verschillende soorten steriele verse media worden bereid en de gewenste micro-organismen worden gekweekt in zuivere of gemengde culturen. Media worden aangevuld met alle voedingsstoffen die nodig zijn voor de groei van het micro-organisme. De actie van het introduceren van het micro-organisme in vers medium of substraat staat bekend als inoculatie. Er moeten echter de optimale groeiomstandigheden worden geboden om een voldoende groei van het micro-organisme te bereiken. Het proces van het verschaffen van de vereiste groeiomstandigheden zoals temperatuur, vocht en pH en het laten groeien van micro-organismen op media staat bekend als incubatie. Het belangrijkste verschil tussen inoculatie en incubatie is dus dat inoculatie de introductie van micro-organismen in groeimedia of substraten is, terwijl incubatie micro-organismen in staat stelt te groeien onder geleverde groeiomstandigheden.
Wat is inenting?
Inoculatie is het proces waarbij micro-organismen worden geïntroduceerd in een groeimedium dat geschikt is voor hun groei. Met andere woorden, inoculatie kan worden gedefinieerd als het proces waarbij een pathogeen of antigeen micro-organisme in een levend organisme wordt geïntroduceerd om de productie van antilichamen te stimuleren. Wanneer de inoculatie is voltooid, beginnen micro-organismen te groeien en zich in het medium te vermenigvuldigen door zichtbare kolonies te vormen.
Er zijn verschillende soorten inentingshulpmiddelen en -technieken die worden gebruikt in de microbiologie. Entlus, entnaald, wattenstaafjes, pincetten, glazen preaders, dispenserpipetten zijn de meest gebruikte inentingsinstrumenten in laboratoria. Al deze materialen moeten vrij zijn van verontreinigingen. Daarom is het vóór inoculatie noodzakelijk om ze te steriliseren met behulp van een geschikte sterilisatietechniek om verontreinigingen of de groei van ongewenste micro-organismen in de kweekmedia te voorkomen. Streepplaatmethode, spreidplaatsmethode, gietplaatmethode, puntinoculatie, steekcultuur, schuine cultuur zijn verschillende enttechnieken die in microbiële laboratoria worden gebruikt om bacteriën en schimmels te laten groeien.
Figuur 01: Inoculatie van bacterie met behulp van streak plate-techniek
Wat is incubatie?
Micro-organismen hebben verschillende groei-eisen. Ze moeten worden voorzien van de benodigde voedingsstoffen, water, mineralen, groeifactoren, sporenelementen en andere groeiomstandigheden. Na het inoculeren van een microbe in een vers medium, moeten de groeiomstandigheden worden gehandhaafd om de groei van het micro-organisme te ondersteunen. Het proces waarbij micro-organismen in een medium kunnen groeien door de nodige groeiomstandigheden te bieden, staat bekend als incubatie. Geënte kweekplaten kunnen in een apparaat dat incubator wordt genoemd voor incubatie worden geplaatst. Incubators zijn zo ontworpen dat de operator de temperatuur, vochtigheid, gasconcentraties, enz. kan regelen volgens de microbe-eis.
Wat zijn de fasen in microbiële groei?
Wanneer optimale omstandigheden worden geboden, hebben micro-organismen de neiging om te groeien, zich voort te planten en zich te vermenigvuldigen door gebruik te maken van de beschikbare voedingsstoffen in het medium. Microbiële groei heeft vier verschillende fasen in een kweekmedium. Na de inenting starten ze de lag-fase. Tijdens de lag-fase vertonen microben geen snelle groei of vermenigvuldiging. Ze beginnen zich aan te passen aan de nieuwe omgeving en stabiliseren zich daar. Zodra ze zijn aangepast, begint de tweede fase, die een exponentiële groei van het micro-organisme laat zien. De tweede fase staat bekend als log-fase of exponentiële fase. Tijdens de logfase vertonen microben een optimale groeisnelheid en vermenigvuldiging. De derde fase start na de logfase wanneer de nutriënten en andere behoeften in het medium beperkt zijn. Tijdens de stationaire fase worden de groei- en sterftesnelheden gelijk en loopt de groeicurve in een rechte lijn evenwijdig aan de x-as. De vierde fase is de doodsfase waarin het sterftecijfer hoger is dan het groeipercentage. Na enkele dagen stopt de microbiële groei en laat een dode cultuur achter.
Figuur 02: Incubator voor microbiële platen
Wat is het verschil tussen inenting en incubatie?
Inoculatie versus incubatie |
|
| Inoculatie is het proces waarbij micro-organismen of suspensies van micro-organismen in een kweekmedium worden geïntroduceerd. | Incubatie is het proces waarbij geïnoculeerde micro-organismen kunnen groeien onder de vereiste groeiomstandigheden. |
| Gebruikte gereedschappen | |
| Enting kan worden gedaan met behulp van entnaalden, entlussen, wattenstaafjes, pipetten, enz. | Incubatie kan in een kweekruimte, incubator, kweekrekken, enz. |
| Tijd | |
| Inenting wordt binnen korte tijd uitgevoerd. | Incubatie duurt enkele uren tot dagen. |
| Condities onderhouden | |
| Inenting gebeurt onder aseptische omstandigheden in een laminaire luchtkast. | Incubatie wordt gedaan door geschikte groeiomstandigheden te bieden, zoals temperatuur, vochtigheid, zuurstofconcentratie, licht, enz. |
Samenvatting – Inenting versus incubatie
Inenting en incubatie zijn twee belangrijke stappen bij het kweken van micro-organismen in laboratoria. Inoculatie is de actie van het introduceren van micro-organismen in een geschikt kweekmedium of substraat. Geënte media worden voorzien van geschikte groeiomstandigheden om te groeien en zich te vermenigvuldigen. Dit proces staat bekend als incubatie. Dit is het belangrijkste verschil tussen inenting en incubatie. Er zijn speciale gereedschappen en apparatuur in microbiële laboratoria voor incubatiedoeleinden. De incubator is een apparaat waarmee micro-organismen kunnen groeien onder gecontroleerde temperatuur, beluchting, vochtigheid, enz. Inoculatie en incubatie moeten worden uitgevoerd onder de juiste aseptische omstandigheden om verontreinigingen en tijdverspilling te voorkomen.
Download PDF-versie van inenting versus incubatie
U kunt de PDF-versie van dit artikel downloaden en gebruiken voor offline doeleinden volgens de citatienotities. Download hier de PDF-versie. Verschil tussen inenting en incubatie.
