Belangrijk verschil – DMEM vs EMEM
Het kweken van dierlijke cellen wordt uitgevoerd om dierlijke cellijnen in stand te houden om veel onderzoeksactiviteiten uit te voeren. Dierlijke cellijnen worden onder steriele omstandigheden gehouden en vereisen speciale technieken. Ze worden gebruikt in onderzoeken naar de productie van vaccins, om het gedrag van de cel ten opzichte van kankerverwekkende en mutagene stoffen te identificeren en bij kankeronderzoek. De celkweekmedia zijn erg belangrijk voor het succes van dierlijke celkweek. Er zijn verschillende soorten celkweekmedia zoals Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) en Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM). DMEM is een gemodificeerd basaal medium met tot een verviervoudiging verhoogde aminozuur- en vitamineconcentraties. Dit omvat ook wat meer vervangingen die de voedingstoestand van de media verhogen. EMEM is een van de eerste soorten dierlijke celkweekmedia ontwikkeld door Harry Eagle. Het is een eenvoudig, basaal medium met de minimale hoeveelheden voedingssamenstellingen. Het belangrijkste verschil tussen twee media is de samenstelling van de voedingsstoffen. EMEM is samengesteld uit de minimale concentraties voedingsstoffen die nodig zijn voor de groei van de cultuur, terwijl DMEM een veel complex medium is met verhoogde concentraties aminozuren en vitamines.
Wat is DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) is een gemodificeerd mediatype dat commercieel wordt bereid als een roomwit poeder. Dit is aangepast vanuit EMEM, en de voedingssamenstelling wordt aangepast door de concentratie van aminozuren en vitamines te verhogen. De concentratie van aminozuren is tot het dubbele verhoogd in vergelijking met het basale medium. De vitamineconcentratie wordt tot het viervoudige verhoogd, waardoor het geh alte aan voedingsstoffen in het medium wordt verhoogd.
DMEM wordt ook gemodificeerd door meer zouten toe te voegen, zoals ijzer(III)nitraat, natriumpyruvaat en enkele niet-essentiële aminozuren zoals serine en glycine. De concentratie van glucose in de media is ook veranderd. De oorspronkelijke formulering is samengesteld uit 1000 mg/L glucose, terwijl bij DMEM de concentratie wordt verhoogd tot 4500 mg/L. DMEM vereist ook suppletie van een serummedium omdat het geen compleet medium is. Meestal wordt DMEM aangevuld met Foetaal Bovine Serum (FBS). FBS levert de benodigde eiwitten en groeifactoren voor het kweekproces.
De pH van het medium varieert bij toevoeging van natriumbicarbonaat. De pH van het medium vóór toevoeging van natriumbicarbonaat is ongeveer 6,80 - 7,40, terwijl de pH na toevoeging van natriumbicarbonaat in het bereik van 7,60 - 8,20 ligt. De opslagtemperatuur van de media is 2 – 8 0C.
Figuur 01: DMEM
Toepassingen van DMEM
- Het plaquevormende vermogen van het polyomavirus in embryonale cellen van muizen bestuderen.
- In onderzoek naar contactremming
- In kippencelculturen
Wat is EMEM?
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) is een van de eerste ontwikkelde media voor het kweken van dierlijke cellijnen. De eerste soorten dierlijke cellijnen die met EMEM zijn gekweekt, zijn Mouse L-cellen en HeLa-cellen. De EMEM-media is ook een soort gemodificeerde media. Harry Eagle formuleerde eerst het EMEM-medium. EMEM-media bevatten de essentiële aminozuren en vitamines in een minimale concentratie die vereist is door de celtypen. De niet-essentiële aminozuren werden niet in de formulering opgenomen en de glucose- en natriumbicarbonaatconcentraties zijn verlaagd. Hoewel de media de uitgebalanceerde hoeveelheid minimale groeivereisten voor de succesvolle groei van de cellen bevatten.
EMEM is geen compleet medium. Daarom is suppletie met serum vereist voor de succesvolle groei van de zoogdiercellen. EMEM wordt gebruikt op een grote verscheidenheid aan cellen en is nog steeds een populair medium onder celcultuuronderzoekers.
Wat zijn de overeenkomsten tussen DMEM en EMEM?
- Beide mediatypes worden gebruikt in dierlijke celcultuur.
- Beide mediatypes zijn vloeibare formuleringen.
- Beide mediatypes zijn gewijzigde media van de basale media.
- Beide mediatypes bevatten de essentiële aminozuren, vitamines en anorganische zouten die nodig zijn voor groei.
- Beide mediatypes zijn onvolledig. Daarom moet serum worden toegevoegd.
- Beide mediatypes gebruiken glucose als koolstofbron.
- Beide mediatypes hebben een hogere pH en worden aangepast door natriumbicarbonaat toe te voegen.
Wat is het verschil tussen DMEM en EMEM?
DMEM vs EMEM |
|
| DMEM is een gemodificeerd type basaal medium, met verhoogde aminozuur- en vitamineconcentraties. Dit omvat ook wat meer vervangingen die de voedingstoestand van de media verhogen. | EMEM is een van de eerste soorten dierlijke celkweekmedia ontwikkeld door Harry Eagle. Het is een eenvoudig, basaal medium met de minimale hoeveelheden voedingssamenstellingen. |
| Modificaties van aminozuur | |
| Aminozuurconcentratie is tot tweemaal toe verhoogd in DMEM-medium. | Minimale concentratie van aminozuur wordt gebruikt in EMEM. |
| Wijzigingen van vitamines | |
| Vitamineconcentratie is tot verviervoudigd in DMEM. | In EMEM wordt een minimale vitamineconcentratie gebruikt. |
| Glucoseconcentratie | |
| Glucoseconcentratie is gestegen tot 4500 mg/L in DMEM. | Glucoseconcentratie is 1000 mg/L in EMEM. |
| Aanwezigheid van niet-essentiële aminozuren | |
| Aanwezig in DMEM. | Afwezig in EMEM. |
| Aanwezigheid van extra componenten | |
| Componenten zoals ijzernitraat en natriumpyruvaat zijn aanwezig in DMEM. | EMEM bevat de minimale hoeveelheid voedingsstoffen. |
Samenvatting – DMEM vs EMEM
DMEM en EMEM zijn twee populaire dierlijke celkweekmedia die voornamelijk verschillen in hun voedingssamenstelling. DMEM is een gewijzigde vorm van EMEM, waarbij de nutriëntenconcentraties worden verhoogd samen met de toevoeging van enkele nieuwe componenten. EMEM is een minimaal medium en bevat alle essentiële factoren die nodig zijn voor de succesvolle groei van de dierlijke cellijnen. Deze media moeten onder zeer steriele omstandigheden worden gebruikt en beide media moeten vóór gebruik worden aangevuld met het serum. Dit is het verschil tussen DMEM en EMEM.
Download de PDF van DMEM vs EMEM
U kunt de PDF-versie van dit artikel downloaden en gebruiken voor offline doeleinden volgens de citatienota. Download hier de PDF-versie. Verschil tussen DMEM en EMEM
