Het belangrijkste verschil tussen HEK293 en HEK293t is dat HEK293 een onsterfelijke cellijn is die is afgeleid van de embryonale menselijke nier die is getransfecteerd met geschoren humaan adenovirus type 5DNA, terwijl HEK293t een dochtercellijn is die is afgeleid van de originele HEK293-cellijn getransfecteerd met een plasmidevector die de replicatieoorsprong van SV40 draagt.
Transfectie wordt meestal gedefinieerd als het proces van het introduceren van vreemd DNA en RNA in cellen om hun genotype en fenotype te beïnvloeden. Dergelijke introducties van vreemde nucleïnezuren via verschillende biologische, chemische en fysische methoden kunnen de eigenschappen van de cel veranderen. Uiteindelijk maakt dit de studie van genfunctie en eiwitexpressie in de context van de cel mogelijk. HEK293 en HEK293t zijn twee cellijnen die al vele jaren uitgebreid worden gebruikt in celbiologisch onderzoek vanwege hun neiging tot transfectie.
Wat is HEK293?
HEK293 is een onsterfelijke cellijn afgeleid van de embryonale menselijke nier die is getransfecteerd met geschoren humaan adenovirus type 5DNA om veel recombinante eiwitten te produceren. HEK293's werden oorspronkelijk geïsoleerd uit menselijke niercellen door de Nederlandse bioloog Alex Van der Eb in 1973. Deze cellen werden gekweekt in weefselkweek van een vrouwelijke foetus. Later werden ze getransfecteerd met geschoren humaan adenovirus type 5DNA door Frank Graham, een postdoctoraal onderzoeker in het laboratorium van Van der Eb. Deze cellijn werd HEK293 genoemd omdat het het 293rd experiment van Frank was.
Figuur 01: HEK293
De opname van adenovirale genen in het HEK-celgenoom stelt deze cellen in staat om zeer efficiënt een grote hoeveelheid recombinante eiwitten te produceren. Bovendien bevat de adenovirale vector het CMV-promotergebied; daarom verhoogt het deze efficiëntie verder. Deze cellijn is gebruikt als gastheer voor genexpressiestudies. Deze cellijn wordt ook gebruikt door de biotechnologische industrie om therapeutische eiwitten te produceren voor gentherapie.
Wat is HEK293t?
HEK293t is een dochtercellijn die is afgeleid van de originele HEK293-cellijn die is getransfecteerd met een plasmidevector die SV40-replicatieoorsprong draagt om een grote hoeveelheid recombinante eiwitten te produceren. HEK293t is een menselijke cellijn die een gemuteerde versie van het SV40 grote T-antigeen tot expressie brengt. HEK293t is gemaakt in het laboratorium van Michele Carlos in Stanford door de stabiele transfectie van de HEK29E-cellijn met een plasmide dat codeert voor een temperatuurgevoelige mutant van het SV40 grote T-antigeen. Het werd oorspronkelijk 293/tsA1609neo genoemd. Dit komt omdat de transfectie die werd gebruikt om een cellijn te creëren die neomycineresistentie en expressie van het tsA 1609-allel van SV40 groot T-antigeen verleent.
Figuur 02: HEK293t
Door de expressie van een mutante versie van SV40 groot T-antigeen, kunnen de getransfecteerde plasmiden met de replicatieoorsprong van SV40 de hoeveelheid recombinant eiwit aanzienlijk verhogen. Deze cellijn wordt veel gebruikt in de biotechnologische industrie voor eiwitexpressie en de productie van recombinante retrovirussen.
Wat zijn de overeenkomsten tussen HEK293 en HEK293t?
- HEK293 en HEK293t zijn twee cellijnen die op grote schaal zijn gebruikt in celbiologisch onderzoek vanwege hun neiging tot transfectie.
- Beide cellijnen zijn afkomstig uit het laboratorium.
- Deze cellijnen kunnen de hoeveelheid recombinante eiwitproductie aanzienlijk verhogen.
- Ze worden gemaakt door embryonale menselijke niercellen te transfecteren met een plasmidevector.
Wat is het verschil tussen HEK293 en HEK293t?
HEK293 is een onsterfelijke cellijn afgeleid van de embryonale menselijke nier die is getransfecteerd met geschoren humaan adenovirus type 5DNA. HEK293t daarentegen is een dochtercellijn die is afgeleid van de oorspronkelijke HEK293-cellijn die is getransfecteerd met een plasmidevector die de replicatieoorsprong van SV40 draagt. Dit is dus het belangrijkste verschil tussen HEK293 en HEK293t. Bovendien brengt HEK293 de mutante versie van het SV40 grote T-antigeen niet tot expressie. Aan de andere kant brengt HEK293t de gemuteerde versie van het SV40 grote T-antigeen tot expressie.
De volgende infographic geeft een overzicht van de verschillen tussen HEK293 en HEK293t in tabelvorm voor vergelijking naast elkaar.
Samenvatting – HEK293 vs HEK293t
HEK293 en HEK293t zijn twee cellijnen die op grote schaal zijn gebruikt in celbiologisch onderzoek vanwege hun gestage groei en neiging tot transfectie. HEK293 is een onsterfelijke cellijn die is afgeleid van een embryonale menselijke nier die is getransfecteerd met geschoren humaan adenovirus type 5DNA, terwijl HEK293t een dochtercellijn is die is afgeleid van de originele HEK293-cellijn die is getransfecteerd met een plasmidevector die SV40-oorsprong van replicatie draagt. Dit vat dus het verschil samen tussen HEK293 en HEK293t.
