Het belangrijkste verschil tussen genamplificatie en genklonering is dat de genamplificatie het proces is waarbij in vitro veel kopieën van het gen van belang worden gemaakt door een polymerasekettingreactie. Maar het klonen van genen is een proces waarbij in vivo veel kopieën van het betreffende gen worden gemaakt door een recombinant plasmide te maken en dit om te zetten in een gastheerbacterie.
Een gen is een specifiek DNA-fragment dat codeert voor een eiwit. Een organisme bezit duizenden genen. Bovendien is het mogelijk om de DNA-sequenties van belangrijke genen te vermenigvuldigen met behulp van moleculair biologische technieken. Genamplificatie en genklonering zijn twee van dergelijke procedures. Beide procedures produceren veel kopieën van een gen van belang. Er is echter een verschil tussen genamplificatie en genklonering in termen van hun methodologie.
Wat is genamplificatie?
Genamplificatie is het proces waarbij kopieën van een bepaald gen worden gemaakt met behulp van een polymerasekettingreactie. Om een gen te amplificeren, moet het DNA van dat specifieke organisme worden geëxtraheerd met behulp van een geschikt DNA-extractieprotocol. Vervolgens moet het geëxtraheerde dubbelstrengs DNA worden gedenatureerd om gescheiden enkele strengen te verkrijgen. De volgende stap omvat het gebruik van een PCR-reactie om kopieën van het gen van belang te maken. Verder bevat het PCR-mengsel de vereiste primers, nucleotiden, DNA-polymerase-enzym, template-DNA en andere ingrediënten. Aan het einde van het PRC-programma vindt amplificatie van het gen van belang plaats.
Figuur 01: Genamplificatie
Bovendien is genamplificatie een eerste stap in de detectie van een specifieke sequentie, identificatie van een organisme, diagnose van ziekten en het maken van genenbibliotheken, enz.
Wat is het klonen van genen?
Gene cloning is een methode in genetische manipulatie om genenbibliotheken te maken of veel kopieën te maken van het gen van belang. Dit proces omvat het maken van een recombinant plasmide en het transformeren van het recombinante plasmide in een gastheercel, in het bijzonder een bacteriële cel. Kloon is een identieke kopie van het oorspronkelijke organisme of een molecuul. Het klonen van genen kan duizenden genklonen maken.
Figuur 02: Genklonen
Zodra het gen van belang is geïdentificeerd, kan het worden gescheiden van het genoom van een bepaald organisme door het te beperken met specifieke restrictie-enzymen. Vervolgens moeten met hetzelfde restrictie-enzym plasmiden (vectoren) worden geopend om het genfragment in te voegen. Vervolgens wordt het recombinante plasmide getransformeerd in een gastheerbacterie met behulp van verschillende methoden, zoals elektroporatie. Sommige van de recombinante plasmiden gaan de bacteriële gastheercellen binnen. Met behulp van een antibioticum kunnen de getransformeerde bacteriën worden geselecteerd, geïsoleerd en gekweekt in verse media. Deze techniek helpt dus om miljoenen genklonen te verkrijgen.
Wat zijn de overeenkomsten tussen genamplificatie en genklonering?
- Genamplificatie en genklonering zijn twee moleculair biologische technieken.
- In beide technieken vermenigvuldigt een bepaalde DNA-sequentie of een gen zich in miljoen of duizenden keren.
- Bovendien zijn beide technieken van het grootste belang voor veel wetenschappelijke gebieden.
Wat is het verschil tussen genamplificatie en genklonering?
Genamplificatie is een proces dat kopieën maakt van een bepaald gen met behulp van een in vitro-methode genaamd PCR. Aan de andere kant is het klonen van genen een proces dat kopieën maakt van een bepaald gen met behulp van de in vivo-methode door recombinante vectoren te construeren en deze in een levend organisme te vermenigvuldigen. Dit is dus het belangrijkste verschil tussen genamplificatie en genklonering. Bovendien duurt genamplificatie slechts een paar uur, terwijl het klonen van genen enkele dagen in beslag neemt. Daarom kunnen we dit ook beschouwen als een verschil tussen genamplificatie en genklonering. Bovendien vertoont het genamplificatieproces minder fouten, terwijl het genkloneringsproces meer fouten vertoont.
De volgende infographic vat het verschil tussen genamplificatie en genklonering samen.
Samenvatting – Genamplificatie versus genklonen
Genamplificatie is het proces van het maken van kopieën van het gewenste gen met behulp van een polymerasekettingreactie onder in vitro omstandigheden, terwijl genklonen het proces is van het maken van kopieën van een gen van belang met behulp van een recombinant DNA-molecuul en een levend organisme/gastheer bacterie. Dit is dus het fundamentele verschil tussen genamplificatie en genklonering.
