Belangrijk verschil - Monolaag versus suspensiecultuur
Weefselkweek is een methode die wordt gebruikt om de groei van cellen te induceren die van het organisme zijn gescheiden en die in verschillende kweekmedia worden gekweekt. Bij weefselkweek spelen de kweekmedia een belangrijke rol. Verschillende cellen groeien in verschillende kweekmedia, afhankelijk van de fysiologische en chemische kenmerken van de cellen. Monolaagcultuur en suspensiecultuur zijn twee hoofdtypen culturen die worden gebruikt tijdens het proces van weefselkweek. Een monolaagcultuur is een verankeringsafhankelijke cultuur waarbij de cel groeit terwijl deze aan een substraat is bevestigd en een suspensiecultuur is een verankeringsonafhankelijke cultuur waarbij celaggregaten worden gebruikt om celculturen in vloeibare media tot stand te brengen. Dit is het belangrijkste verschil tussen monolaagcultuur en suspensiecultuur.
Wat is Monolayer Culture?
Eenlagige cultuur wordt gedefinieerd als een soort cultuur waarin cellen in een enkele laag worden gekweekt op een kolf of petrischaal die het kweekmedium bevat. Monolaagcultuur wordt ook wel hechtende cultuur of verankeringsafhankelijke cultuur genoemd. De reden om te verwijzen naar hechtende of verankeringsafhankelijke kweek is dat deze cellen een substraat nodig hebben voor hechting tijdens hun groei. Ze hechten zich aan de celcultuur die het substraat bevat.
De substraten die in het kweekmedium worden gebruikt, moeten vóór gebruik worden opgeladen. Deze geladen substraten bevorderen cel tot cel interacties. Elektrische ionenontladers, divalente kationcoatings en gammastraling zijn de bronnen die gebruikt worden om deze substraten op te laden. In monolaag kweekmedium, zodra de cellen zijn ingeënt, wordt de groei gereguleerd met behulp van het proces dat contactremming wordt genoemd. Tijdens contactremming wordt de celgroei gestopt om de proliferatie van normale cellen te stoppen zodra ze een monolaag hebben gevormd die aan het oppervlak is bevestigd.
Figuur 01: Aanhankelijke cultuur
De cellen die voor hechting afhankelijk zijn van andere substraten, worden hechtende cellen genoemd. Deze hechtende cellen zijn vaak afgeleid van orgaanweefsels zoals nieren, enz. Deze cellen zijn onbeweeglijk en zijn typisch gehecht aan het bindweefsel. Daarom moeten al deze essentiële groeifactoren worden verstrekt bij het kweken van deze cellen op kweekmedia. Het belang van monolaagcultuur is dat het de oorspronkelijke natuurlijke omstandigheden nabootst waarin de cel zich goed kan vestigen.
Wat is Suspension Culture?
Een suspensiekweek zou kunnen worden gedefinieerd als een soort cultuur waarbij vermenigvuldiging van een klein aggregaat van cellen of enkele cellen plaatsvindt, gesuspendeerd in een vloeibaar medium dat constant wordt geroerd. Met andere woorden, suspensiekweek is ook bekend als celkweek of celsuspensiekweek. Deze cultuur helpt bij het opzetten van eencellige culturen die kunnen worden gebruikt tijdens het onderzoek van plantencellen met betrekking tot hun verschillende mogelijkheden en eigenschappen. Onderzoek naar dit aspect kan worden gebruikt om de onderlinge relaties tussen cellen en hun invloeden als het gaat om meercellige organismen te begrijpen.
Tijdens de initiële ontwikkeling van de plant wordt een callus gevormd die bestaat uit een massa ongedifferentieerde cellen. Dit groeiniveau veroorzaakt obstakels voor de identificatie van cellulaire gebeurtenissen tijdens de groei- en ontwikkelingsfasen van de plant. Suspensiecultuur werd geïntroduceerd om deze situatie te overwinnen, aangezien het een uitstekend kweekmedium verschafte voor de vestiging van enkele celculturen uit kleine celaggregaten verkregen uit de callus. Dit werd gebruikt om verschillende morfologische en biochemische aspecten te bestuderen tijdens de beginfase van de ontwikkeling van een plant.
Figuur 02: Suspensiecultuur
In de context van het verkrijgen van een ideale celcultuur, is de typische methode om een brokkelige massa van callus over te brengen in een geroerd vloeibaar medium waar de massa gemakkelijk wordt gebroken en verspreid. Daarna worden de grote calli uitgezeefd waarbij de kleine celaggregaten en enkele cellen. Vervolgens worden deze cellen overgebracht naar een ander medium. Actief groeiende cellen worden na twee tot drie weken verkregen.
Wat zijn de overeenkomsten tussen monolaag- en suspensiecultuur?
- Zowel monolaag- als suspensieculturen zijn twee soorten celculturen die worden gebruikt voor de vestiging van cellen
- Kweken van zowel monolaag als suspensie worden gekweekt op geschikte kweekmedia.
- Zowel monolaag- als suspensieculturen worden vaak gebruikt in weefselkweek.
Wat is het verschil tussen monolaag- en suspensiecultuur?
Monolaag versus suspensiecultuur |
|
| Een monolaagcultuur is een verankeringsafhankelijke cultuur waarbij de cellen worden gekweekt terwijl ze aan een substraat zijn bevestigd. | Suspensiecultuur is een verankeringsonafhankelijke cultuur waarbij vermenigvuldiging van kleine aggregaten van cellen of enkele cellen plaatsvindt, gesuspendeerd in een vloeibaar medium dat wordt geroerd. |
| Vereisten | |
| Eenlagige cultuur vereist een met weefselkweek behandeld vat met periodieke passage. | Suspensiecultuur kan worden bereikt door niet met weefselkweek behandelde vaten. |
| Groeibeperkingen | |
| De groei van monolaagcultuur wordt beperkt door het oppervlak dat direct van invloed is op de opbrengst. | Groeibeperking van de suspensiecultuur vindt plaats door de concentratie van cellen in het medium. |
| Celdissociatie | |
| Celdissociatie vindt mechanisch of enzymatisch plaats in monolaagcultuur. | Suspension Culture vereist geen hulp van enzymen en mechanische middelen voor celdissociatie. |
| Celvisualisatie | |
| Eenlagige cultuur maakt eenvoudige visualisatie van cellen mogelijk. | Het is moeilijker om cellen in suspensieculturen te bekijken. |
| Functie | |
| Eenlagige cultuur wordt gebruikt op het gebied van cytologie, onderzoek en continu oogsten van producten. | Suspensiecultuur wordt gebruikt voor de bulkproductie van eiwitten, onderzoeksstudies en batch-oogst. |
Samenvatting – Monolaag versus suspensiecultuur
Eenlagige cultuur en suspensiecultuur zijn twee hoofdculturen die worden gebruikt in weefselkweek. De monolaagcultuur is een verankeringsafhankelijke cultuur. De cellen worden in deze kweek gekweekt waar ze worden vastgemaakt aan een in de kweek aanwezig substraat. De substraten worden vóór gebruik opgeladen met de betrokkenheid van verschillende bronnen zoals tweewaardige coatings en ionenontladers. Suspensieculturen zijn verankeringonafhankelijke culturen waarbij de cellen groeien zonder de hulp van een substraat voor hechting. Deze cultuur helpt bij het opzetten van eencellige culturen die kunnen worden gebruikt tijdens het onderzoek van plantencellen met betrekking tot hun verschillende mogelijkheden en eigenschappen. Dit is het verschil tussen monolaagcultuur en suspensiecultuur.
