Het belangrijkste verschil tussen de bradford- en lowry-eiwittest is dat de Bradford-eiwittest is gebaseerd op de absorptieverschuiving van de kleurstof Coomassie brilliant blue G-250, terwijl de Lowry-eiwittest is gebaseerd op de reactie van koperionen (Cu+) -ionen geproduceerd door de oxidatie van peptidebindingen met Folin-Cioc alteu-reagens.
Een test is een analytische techniek die helpt bij het karakteriseren van de belangrijkste functionele componenten van een monster. Daarom kan een test zowel een kwalitatieve als een kwantitatieve test zijn. Veel gebieden, waaronder laboratoriumgeneeskunde, farmacologie, milieubiologie, moleculaire biologie, biochemie en immunologie, gebruiken dit soort tests routinematig. Bradford- en Lowry-eiwitassay zijn twee biochemische assays die de eiwitconcentratie in een monsteroplossing bepalen. Beide testen gebruiken colorimetrische technieken om resultaten te verkrijgen.
Wat is Bradford Protein Assay?
Bradford-eiwittest is een snelle spectroscopische analytische procedure voor eiwitanalyse. Het vertoont een hoge nauwkeurigheid bij het meten van de eiwitconcentratie in een oplossing. Marion Bradford introduceerde deze procedure in 1976. In deze test wordt de totale reactie gebaseerd op de aminozuursamenstelling van de gemeten eiwitten. Met andere woorden, de Bradford-eiwittest is een colorimetrische test. Het maakt gebruik van de kleurstof Coomassie briljant blauw. Daarom hangt deze colorimetrische eiwittest af van de absorptieverschuiving van de kleurstof. Coomassie brilliant blue G-250 bestaat in drie formaten: kationisch (rood), anionisch (blauw) en neutraal (groen). Tijdens zure omstandigheden wordt de rode vorm van de kleurstof omgezet in blauw. Het bevestigt de binding van het eiwit. Als het eiwit niet aanwezig is, kan de oplossing bruin van kleur blijven.
Figuur 01: Bradford-eiwittest
Bradford-eiwitassay verschilt van andere eiwitassays omdat het minder gevoelig is voor interferentie van verschillende chemische verbindingen die in de eiwitoplossing aanwezig zijn. Deze verbindingen omvatten natrium, kalium, glucose en sucrose, enz.
Wat is Lowry Protein Assay?
Lowry-eiwittest is een biochemische test die wordt gebruikt om het totale eiwitgeh alte in een oplossing te bepalen. Oliver H. Lowry is de persoon die dit reagens in 1940 heeft ontwikkeld. De procedure geeft de totale eiwitconcentratie van de oplossing weer door een kleurverandering die evenredig is met de eiwitconcentratie in de oplossing. Dit is dus ook een colorimetrische eiwittest.
De reactie tussen koperionen (Cu+) geproduceerd door de oxidatie van peptidebindingen en Folin-Cioc alteu-reagens vormt de basis van deze procedure. Dit reagens bevat ook fosfomolybdeenzuur en fosforwolfraamzuur. Het reactiemechanisme van de Lowry-eiwittest is echter niet goed begrepen. Maar het omvat de oxidatie van cysteïne-, tryptofaan- en tyrosineresiduen door de reductie van Folin-Cioc alteu-reagens.
Figuur 02: Lowry-eiwittest
De cysteïneresiduen dragen bij aan de absorptie die wordt waargenomen in de Lowry-eiwittest en de reactie resulteert in een briljant blauw molecuul; heteropoly molybdeen blauw. De reductie van dit molecuul wordt gemeten door absorptie bij 660 nm. Vandaar dat de concentratie van cysteïne- en tryptofaanresiduen die het Folin-Cioc alteu-reagens verminderde, de totale concentratie van het eiwit in de oplossing afleidt.
Wat zijn de overeenkomsten tussen Bradford en Lowry Protein Assay?
- Bradford- en Lowry-eiwitassays bepalen de eiwitconcentratie in een oplossing.
- Beide methoden zijn colorimetrische methoden.
- Ook de gevoeligheid van beide methoden is hoog.
Wat is het verschil tussen Bradford en Lowry Protein Assay?
Bradford- en Lowry-eiwittest zijn twee soorten tests die de eiwitconcentratie in een oplossing bepalen. De Bradford-eiwittest is gebaseerd op de absorptieverschuiving van de kleurstof Coomassie brilliant blue G-250, terwijl de Lowry-eiwittest afhankelijk is van de reactie van koperionen geproduceerd door de oxidatie van peptidebindingen, met Folin-Cioc alteu-reagens. Dit is dus het belangrijkste verschil tussen de eiwittest van Bradford en Lowry. De Bradford-eiwittest duurt 15 minuten om een resultaat te produceren, terwijl de Lowery-eiwittest 40-60 minuten duurt om een resultaat te produceren. Dit is dus een ander verschil tussen de eiwittest van Bradford en Lowry. Bovendien is de Bradford-eiwittest afhankelijk van de aminozuursamenstelling, terwijl de Lowry-eiwittest gedeeltelijk afhankelijk is van de aminozuursamenstelling. Daarom is dit ook een verschil tussen de eiwittest van Bradford en Lowry.
Hieronder biedt inforaphic meer details over het verschil tussen de Bradford- en Lowry-eiwittest.
Samenvatting – Bradford vs Lowry Protein Assay
Een test is een analytische techniek die wordt gebruikt om de belangrijkste functionele component van een monster te karakteriseren. Bradford- en Lowry-eiwitassay zijn twee soorten eiwitassays die werken onder colorimetrische technieken. Zowel Bradford- als Lowry-eiwitassays bepalen de eiwitconcentratie in een oplossing. Het belangrijkste verschil tussen Bradford en Lowry Protein Assay ligt echter in de colorimetrische techniek die ze gebruiken. De Bradford-eiwittest maakt gebruik van de Coomassie brilliant blue G-250, terwijl de Lowry-eiwittest koperionen (Cu +) -ionen en Folin-Cioc alteu-reagens gebruikt. Bovendien geeft de Bradford-methode snelle resultaten dan de Lowry-eiwittest. Beide methoden zijn echter zeer gevoelige methoden en zijn onderhevig aan interferentie van verschillende stoffen.
