Het belangrijkste verschil tussen fluorescentiemicroscopie en confocale microscopie is dat bij fluorescentiemicroscopie het hele monster gelijkmatig wordt overspoeld met licht van een lichtbron, terwijl bij confocale microscopie slechts enkele punten van het monster worden blootgesteld aan licht van een lichtbron.
Fluorescentiemicroscopie is een belangrijke analytische techniek die nuttig is bij het bestuderen van de eigenschappen van organische of anorganische stoffen. Confocale microscopie is een analytische techniek die nuttig is bij het verhogen van de optische resolutie en het contrast van een microfoto met behulp van een ruimtelijk gaatje om onscherp licht in beeldvorming te blokkeren.
Wat is fluorescentiemicroscopie?
Fluorescentiemicroscopie is een belangrijke analytische techniek die nuttig is bij het bestuderen van de eigenschappen van organische of anorganische stoffen. Het instrument dat we voor deze meting gebruiken is een fluorescentiemicroscoop. Het is een soort optische microscoop. Dit type optische microscoop gebruikt fluorescentie in plaats van verstrooiing, reflectie, verzwakking en absorptie of in aanvulling daarop.
Een fluorescentiemicroscoop gebruikt fluorescentie om een beeld te genereren. Het kan een eenvoudige opstelling zijn zoals een epifluorescentiemicroscoop of een meer gecompliceerd ontwerp, inclusief een confocale microscoop die optische coupes gebruikt. Dit helpt bij het verkrijgen van een betere resolutie van het fluorescentiebeeld.
Figuur 01: Een fluorescentiemicroscoop
Als we het principe van fluorescentiemicroscopie overwegen, moeten we het monster gebruiken voor verlichting met licht van een specifieke golflengte. Daar absorbeert het monster licht door fluoroforen, waardoor ze licht met langere golflengten uitstralen. Het is belangrijk om het verlichte licht te scheiden van veel zwakker uitgezonden fluorescentie door het gebruik van een spectrale emissiefilter.
Normaal gesproken bevat een fluorescentiemicroscoop een lichtbron, een excitatiefilter, een dichroïsche spiegel en een emissiefilter. De lichtbron kan een xenonbooglamp, kwikdamplamp, LED's en lasers zijn. De dichroïsche spiegel is ook bekend als een dichroïsche bundelsplitser.
Wat is confocale microscopie?
Confocale microscopie is een analytische techniek die nuttig is bij het verhogen van de optische resolutie en het contrast van een microfoto met behulp van een ruimtelijk gaatje om onscherp licht in beeldvorming te blokkeren. Het is ook bekend als confocale laser scanning microscopie of laser confocale scanning microscopie. Het is een optische beeldvormingstechniek.
In deze microscopische techniek maakt het vastleggen van meerdere 2D-beelden op verschillende diepten in een monster de reconstructie van 3D-structuren binnen een object mogelijk. De confocale microscopische techniek is uitgebreid bruikbaar in wetenschappelijke en industriële gemeenschappen. Het wordt meestal gebruikt in biowetenschappen, halfgeleiderinspectie en materiaalwetenschap.
Figuur 02: Het principe van de confocale puntsensor uit het octrooi van Minsky
Tijdens het proces reist licht door het monster onder een conventionele microscoop zo ver in het monster als het zou kunnen doordringen, terwijl een confocale microscoop die slechts een kleinere lichtstraal focust, tegelijkertijd door een smal diepteniveau gaat. Deze techniek is in 1957 ontwikkeld door Marvin Minsky.
Wat is het verschil tussen fluorescentiemicroscopie en confocale microscopie?
Fluorescentiemicroscopie is een belangrijke analytische techniek die nuttig is bij het bestuderen van de eigenschappen van organische of anorganische stoffen. Confocale microscopie is een analytische techniek die nuttig is bij het verhogen van de optische resolutie en het contrast van een microfoto met behulp van een ruimtelijk gaatje om onscherp licht in beeldvorming te blokkeren. Het belangrijkste verschil tussen fluorescentiemicroscopie en confocale microscopie is dat bij fluorescentiemicroscopie het hele monster gelijkmatig wordt overspoeld met licht van een lichtbron, terwijl bij confocale microscopie slechts enkele punten van het monster worden blootgesteld aan licht van een lichtbron.
De onderstaande infographic presenteert de verschillen tussen fluorescentiemicroscopie en confocale microscopie in tabelvorm voor vergelijking naast elkaar.
Samenvatting – Fluorescentiemicroscopie versus confocale microscopie
Fluorescentiemicroscopie en confocale microscopie zijn twee analytische technieken die betrokken zijn bij optische beeldvorming. Het belangrijkste verschil tussen fluorescentiemicroscopie en confocale microscopie is dat bij fluorescentiemicroscopie het hele monster gelijkmatig wordt overspoeld met licht van een lichtbron, terwijl bij confocale microscopie slechts enkele punten van het monster worden blootgesteld aan licht van een lichtbron.
