Transformatie vs Transfectie
Transformatie en transfectie zijn twee eenvoudige technieken die worden gebruikt om een vreemd gen in een gastheercel te introduceren. Deze technieken zijn echter afhankelijk van het type host of vectorsystemen.
Wat is celtransformatie?
Transformatie is de techniek die wordt gebruikt om genen in gist- en bacteriële cellen te introduceren. Deze techniek veroorzaakt meestal erfelijke veranderingen in genen, en dus is de expressie van het gen permanent. De bacteriële transformatie werd voor het eerst geïntroduceerd in 1928 door Frederick Griffith. Toen, in het begin van de jaren zeventig, werd deze techniek gebruikt in E.coli. Tijdens het transformatieproces van E. coli worden de cellen gedrenkt in een ijskoude oplossing van CaCl2 Deze stap maakt E.coli-cellen competent. Daarna worden de competente cellen gemengd met het plasmide-DNA en 20-30 minuten op ijs geïncubeerd. Vervolgens wordt een korte hitteschok gegeven om de overdracht van DNA in de cel mogelijk te maken. Ten slotte worden de cellen in een voedingsbodem geplaatst en 60-90 minuten bij 37 ° C geïncubeerd om de plasmiden vast te stellen. Zodra deze stappen met succes zijn voltooid, kunnen de getransformeerde cellen op een geschikt medium worden geplaatst voor vermeerdering van cellen. Aangezien transformatie als een inefficiënte techniek wordt beschouwd, mag deze niet worden gebruikt voor het maken van kloonbanken.
Wat is celtransfectie?
Transfectie is een methode voor het inbrengen van een vreemd gen, gewoonlijk, in zoogdiercellen. Er zijn twee methoden voor transfectie; namelijk voorbijgaande transfectie en stabiele transfectie. Bij transiënte transfectie is genexpressie gedurende een beperkte tijd beschikbaar; dus veroorzaakt de wijziging van het gen tijdelijke expressie. Deze transfectiemethode is eenvoudig en snel; daarom kan het routinematig worden gebruikt. Een nadeel van transiënte transfectie is de moeilijkheid om grootschalige eiwitsynthesesystemen aan te vragen.
Tijdens stabiele transfectie wordt een doelgen geïntegreerd in het genoom van de gastheercel, en dus is de genexpressie permanent, in tegenstelling tot de transiënte transfectie.
Wat is het verschil tussen transformatie en transfectie?
• Transformatie is de introductie van een gen in een prokaryotische cel (bacterieel en gist), terwijl transfectie gewoonlijk de introductie van een gen in een zoogdiercel wordt genoemd.
• Transformatie resulteert in erfelijke verandering, in genen, terwijl transfectie kan resulteren in tijdelijke expressie of permanente veranderingen in genen.
