Het belangrijkste verschil tussen het totale aantal cellen en het aantal levensvatbare cellen is dat het totale aantal cellen alle cellen schat, inclusief zowel levende als dode microbiële cellen in een monster, terwijl het aantal levensvatbare cellen alleen de levende microbiële cellen in een monster schat.
Het tellen van het aantal organismen binnen een populatie wordt noodzakelijk geacht voor het meeste experimentele werk. Daarom proberen we het aantal microben in een monster te analyseren met behulp van directe en indirecte methoden. Directe metingen omvatten methoden die celaantallen direct tellen. Indirecte metingen omvatten het meten van een parameter die verband kan houden met het aantal cellen, zoals celdichtheid, drooggewicht, enz. Sommige methoden kwantificeren alleen de levende microbiële cellen in een monster. Levensvatbare celtelling is zo'n methode. Directe microscopische tellingen kwantificeren alle cellen in een bekend volume medium/monster met behulp van een microscoop. Daarom telt het zowel levende als dode cellen. Het is een soort totaal aantal cellen.
Wat is het totale aantal cellen?
Totaal aantal cellen is de methode waarbij alle cellen in een bekend volume medium/monster worden geteld met behulp van een microscoop en een telkamer (hemocytometer). In tegenstelling tot levensvatbare tellingen, worden zowel levende als dode cellen geteld. Daarom is dit een totale telling, tenzij tijdens de observatie een levensvatbaarheidskleuring wordt aangebracht. Bij microscopie worden de cellen direct onder de microscoop bekeken en geteld. Het maakt gebruik van een celsuspensie die bestaat uit microbiële cellen. Voor het gemak van tellen en nauwkeurige metingen kan verdunning van het monster worden gedaan. In zeer hoge/lage concentraties cellen is het verkrijgen van het totale aantal cellen met behulp van een microscoop een moeilijke taak.
Figuur 01: Telkamer – Hemocytometer
Telkamers zijn gemakkelijk, goedkoop en snel in het meten van het totale aantal cellen. Het belangrijkste is dat telkamers nuttig zijn voor het tellen van zowel eukaryoten als prokaryoten. We tellen cellen in geselecteerde vierkanten van bekend volume om het totale aantal cellen te kwantificeren.
Wat is een levensvatbaar celgetal?
Levensvatbare celtelling is een methode om levende microbiële cellen in een monster te tellen. Het telt alleen levende cellen in het monster. Levensvatbare plaattelling, membraanfiltratie en het meest waarschijnlijke aantal zijn enkele technieken voor het tellen van levensvatbare cellen. Deze benaderingen zijn gebaseerd op groei. De levensvatbare plaattellingsmethode is een krachtige methode die in veel microbiologische gebieden wordt gebruikt, waaronder voedsel- en zuivelmicrobiologie, medische microbiologie, milieumicrobiologie, microbiële genetica, ontwikkeling van groeimedia en biotechnologie.
De meest gebruikelijke manier om levensvatbare bacteriën te tellen, is door een monster te gebruiken dat kolonies kan vormen op een agarmedium. Er zijn twee manieren om een plaattelling uit te voeren: spreidplaattechniek en gietplaattechniek. Een bekend monstervolume kan op het oppervlak van een agarplaat worden uitgespreid of in de agar worden gemengd. De plaat wordt vervolgens geïncubeerd en de ontstane kolonies worden geteld. Het aantal kolonies is gerelateerd aan het aantal micro-organismen in het oorspronkelijke monster. Levensvatbare tellingen meten alleen die cellen die leven en groeien.
Figuur 02: Levensvatbaar aantal platen
Most probable number (MPN) is een alternatief voor plaattellingsmethoden voor het schatten van de populatiedichtheid van levensvatbare cellen. Het telt organismen die in vloeibare cultuur groeien en is dus een overwegend bacteriologische techniek. Het is bijzonder nuttig voor lage concentraties van organismen, b.v. melk, drinkwater.
Membraanfiltratietechniek is meer geschikt wanneer microben erg verdund zijn, zoals in de watervoorziening van een stad. Het wordt eenvoudig gedaan door een bekend volume van de vloeistof door een filter te leiden en het op een voedingsbodem te incuberen. Kolonies die zich op het filter ontwikkelen, worden geteld en de bacteriën per milliliter van het monster worden berekend.
Wat zijn de overeenkomsten tussen het totale aantal cellen en het levensvatbare aantal cellen?
- Totaal aantal cellen en aantal levensvatbare cellen zijn twee soorten microbiële technieken die cellen kwantificeren.
- Het zijn veelgebruikte teltechnieken in microbiologische laboratoria.
Wat is het verschil tussen het totale aantal cellen en het levensvatbare aantal cellen?
Totaal aantal cellen geeft een opsomming van alle levende en dode microbiële cellen in een monster. Daarentegen somt het aantal levensvatbare cellen alleen de levende cellen in een monster op. Dit is dus het belangrijkste verschil tussen het totale aantal cellen en het aantal levensvatbare cellen. Het totale aantal cellen is onafhankelijk van de groei van kolonies op agarplaten, terwijl het aantal levensvatbare cellen een op groei gebaseerde techniek is en afhankelijk is van de groei van microbiële kolonies op agarplaten.
De onderstaande infografiek vat het verschil samen tussen het totale aantal cellen en het aantal levensvatbare cellen.
Samenvatting – Totaal aantal cellen versus levensvatbaar aantal cellen
Het totale aantal cellen somt zowel levende als dode microbiële cellen op, terwijl het aantal levensvatbare cellen alleen de levende cellen opsomt. Dit is dus het belangrijkste verschil tussen het totale aantal cellen en het aantal levensvatbare cellen. Ook is het aantal levensvatbare cellen een op groei gebaseerde techniek, in tegenstelling tot het totale aantal cellen. Bovendien vereist het incubatie van platen totdat de zichtbare kolonies worden verkregen. Levensvatbare plaattelling, MPN en membraanfiltratie zijn enkele technieken voor het tellen van levensvatbare cellen, terwijl directe microscopie en het gebruik van hemocytometer twee technieken zijn voor het totale aantal cellen.
