Het belangrijkste verschil tussen differentiële en dichtheidsgradiëntcentrifugatie is dat differentiële centrifugatie deeltjes in een mengsel scheidt op basis van de grootte van de deeltjes, terwijl dichtheidsgradiëntcentrifugatie deeltjes in een mengsel scheidt op basis van de dichtheid van de deeltjes.
Centrifugatie is een scheidingsmethode van verschillende componenten in een analytmengsel. Deze methode omvat de rotatie van het monster rond een vaste as, waardoor een middelpuntvliedende kracht wordt opgewekt. De middelpuntvliedende kracht zorgt ervoor dat de deeltjes in het monster door een vloeibaar medium naar beneden bewegen. Dit proces veroorzaakt de sedimentatie van deeltjes of cellen met verschillende afmetingen en dichtheden met verschillende snelheden.
Wat is differentiële centrifugatie?
Differentiële centrifugatie is een analytische techniek waarbij we de deeltjes in een mengsel kunnen scheiden, afhankelijk van de grootte van het deeltje. Het is de eenvoudigste vorm van centrifugeren en wordt ook wel differentieel pelleteren genoemd. Deze methode is belangrijk bij het scheiden van de componenten in een cel. Deeltjes met verschillende afmetingen ondergaan sedimentatie met verschillende snelheden bij het centrifugeren. Met andere woorden, grote deeltjes bezinken sneller dan kleinere deeltjes. Bovendien kan de sedimentatiesnelheid worden verhoogd door de middelpuntvliedende kracht te vergroten.
Bij het overwegen van de toepassingen is differentiële centrifugatie nuttig bij het oogsten van cellen of het produceren van ruwe subcellulaire fracties uit een weefselhomogenaat.bijv. een leverhomogenaat bevat kernen, mitochondriën, lysosomen en membraanblaasjes. Als we dit homogenaat met een lage snelheid en voor een korte tijd centrifugeren, kunnen we de grote kernen als de pellet krijgen. Als we een hoge middelpuntvliedende kracht gebruiken, kunnen we mitochondriën in de pellet krijgen. Biologische monsters zijn echter altijd vatbaar voor besmetting.
Wat is centrifugeren met dichtheidsgradiënt?
Densiteitsgradiëntcentrifugatie is een analytische techniek waarbij we de deeltjes in het analytmengsel kunnen scheiden op basis van de dichtheid van het deeltje. Bij deze methode worden de stoffen geconcentreerd in een oplossing van cesiumzouten of in sucrose. De methode omvat de fractionering van deeltjes op basis van de dichtheid van het drijfvermogen. De dichtheidsgradiënt bij deze methode is het cesiumzout of het sucrosemedium. Er zijn twee soorten dichtheidsgradiëntcentrifugatie: rate-zonla centrifugatie en isopycnic centrifugatie.
De snelheid-zonale centrifugatie omvat de scheidingsmedia met een gelaagde structuur met een smalle zone bovenop de dichtheidsgradiënt. In dit proces hebben de deeltjes de neiging om met verschillende snelheden te bewegen onder de middelpuntvliedende kracht, afhankelijk van de dichtheid van de deeltjes. Gewoonlijk produceren alle deeltjes pellets omdat de dichtheid van de deeltjes hoger is dan de dichtheidsgradiënt.
Isopycnic centrifugatie is het tweede type dichtheidsgradiënt centrifugatiemethode. Het begint met een homogene oplossing. Onder de middelpuntvliedende kracht bewegen de deeltjes in het analytmengsel totdat de dichtheid van de deeltjes vergelijkbaar is met de dichtheidsgradiënt. Daarom kunnen we deze techniek ook evenwichtscentrifugatie noemen.
Wat is het verschil tussen differentiële en dichtheidsgradiëntcentrifugatie?
Differentiële en dichtheidsgradiëntcentrifugatie zijn twee soorten centrifugatieprocessen die betrokken zijn bij de scheiding van componenten in een analytmengsel. Het belangrijkste verschil tussen centrifugatie met differentiële en dichtheidsgradiënt is dat differentiële centrifugatie deeltjes in een mengsel scheidt op basis van de grootte van de deeltjes, terwijl centrifugatie met dichtheidsgradiënt deeltjes in een mengsel scheidt op basis van de dichtheid van de deeltjes.
De onderstaande infographic geeft meer verschillen weer tussen differentiële en dichtheidsgradiëntcentrifugatie.
Samenvatting - Centrifugatie met differentiële versus dichtheidsgradiënt
Differentiële en dichtheidsgradiëntcentrifugatie zijn twee soorten centrifugatieprocessen die betrokken zijn bij de scheiding van componenten in een analytmengsel. Het belangrijkste verschil tussen centrifugatie met differentiële en dichtheidsgradiënt is dat differentiële centrifugatie deeltjes in een mengsel scheidt op basis van de grootte van de deeltjes, terwijl centrifugatie met dichtheidsgradiënt deeltjes in een mengsel scheidt op basis van de dichtheid van de deeltjes.
