Belangrijk verschil - Transformanten vs Recombinanten
Recombinatie en transformatie zijn twee cruciale stappen in genetische manipulatie, waarbij de kenmerken van een organisme opzettelijk worden gewijzigd door het genetische materiaal ervan te manipuleren. Recombinatie is een proces waarbij vreemd DNA wordt opgenomen in een vectorgenoom en recombinant DNA-molecuul wordt gevormd. Transformatie is de volgende stap waarin recombinant molecuul in het gastheerorganisme wordt ingevoerd. De gastheercel of het organisme vergemakkelijkt de expressie van het recombinante molecuul. Het belangrijkste verschil tussen transformanten en recombinanten is dat transformanten de cellen of de organismen zijn die het recombinante molecuul naar binnen nemen en expressie vergemakkelijken, terwijl recombinanten de vectoren zijn die insertie van het vreemde DNA in zijn genoom en transport naar gastheertransformanten voor expressie mogelijk maken.
Wat zijn Transformanten?
Transformanten zijn de cellen of de organismen waarin recombinant DNA wordt opgenomen voor de expressie. Bacteriën worden vaak gebruikt als gastheerorganismen bij genetische manipulatie, omdat ze gemakkelijk te kweken, te vermenigvuldigen en te hanteren zijn onder laboratoriumomstandigheden en het transformatieproces eenvoudig is in vergelijking met andere organismen. De meest populaire gastheerbacterie die bij genetische manipulatie wordt gebruikt, is de bacterie E coli.
Tijdens het transformatieproces worden gastheercellen geïnduceerd om de recombinanten op te nemen. Sommige gastheercellen nemen echter geen recombinante moleculen op. Ze staan bekend als niet-transformanten en de cellen die recombinante DNA-moleculen bevatten, staan bekend als transformanten. Selectie van transformanten van niet-transformanten wordt gedaan met behulp van selecteerbare markers in de moleculaire biologie. Selecteerbare markers worden samen met het DNA-insert in het vectorgenoom ingevoegd. Veelgebruikte selecteerbare markers zijn antibioticaresistente genen. Markergenen vergemakkelijken de differentiatie van transformanten en zetten het proces voort. Na het transformatieproces wordt de bacterie gekweekt in een antibioticumbevattend medium. Alleen de transformanten kunnen op dat medium groeien, omdat ze de recombinanten erin hebben.
Zodra het recombinante DNA-molecuul in het gastheerorganisme is getransformeerd, kan het vreemde DNA ofwel worden geïntegreerd in het genoom van de gastheercel of niet-geïntegreerd blijven in het cytoplasma. De expressie en de replicatie van het vreemde DNA vinden echter plaats in het gastheerorganisme en produceren het gewenste resultaat van het proces.
Wat zijn recombinanten?
Een recombinant is een organisme of een cel die een gerecombineerd genoom heeft dat vreemd DNA bevat. Recombinanten zijn het resultaat van het genetische manipulatieproces. Ze worden in vitro kunstmatig geconstrueerd door de genen van belang in te voegen en het genoom te modificeren. Vaak fungeren bacteriële plasmiden en bacteriofagen als recombinanten bij genetische manipulatie. Het heeft hersenschimmen van verschillende DNA's. Recombinant DNA-molecuul draagt vreemd DNA naar het gastheerorganisme en zorgt ervoor dat het het gewenste product tot expressie brengt en vormt.
Recombinante moleculen worden geconstrueerd met behulp van restrictie-endonucleasen en DNA-ligasen. Het gewenste DNA-fragment wordt gescheiden van het oorspronkelijke organisme en in de vector ingevoegd om de recombinant voor transformatie te maken. Het knippen van het gen van belang en het openen van het vectororganisme moet worden gedaan met hetzelfde restrictie-enzym om compatibele plakkerige uiteinden te creëren om ze samen te voegen. Zodra het vreemde DNA in het vectorgenoom is opgenomen, staat het bekend als recombinant of het recombinante DNA-molecuul.
Figuur 02: Recombinant DNA
Wat is het verschil tussen Transformanten en Recombinanten?
Transformanten vs Recombinanten |
|
| Transformanten zijn de cellen met daarin een recombinant DNA-molecuul. | Recombinanten zijn de dragermoleculen waarin vreemd DNA in het eigen genoom is ingebracht. |
| Expressie van vreemd DNA | |
| Het zijn de gastheercellen die het recombinante DNA tot expressie kunnen brengen. | Ze moeten zichzelf kunnen repliceren binnen het gastheerorganisme. |
| Selectie | |
| Cellen die gemakkelijk kunnen worden gekweekt en vermenigvuldigd, worden geselecteerd als gastheercellen. | Ze moeten gemakkelijk te extraheren zijn en moeten selecteerbare markeringen bevatten. |
Samenvatting – Transformanten vs Recombinanten
Transformanten zijn de cellen of organismen met daarin recombinante DNA-moleculen. Recombinanten zijn de organismen of de cellen die genetische recombinatie hebben ondergaan en vreemd DNA in hun genomen hebben. Bacteriële cellen worden vaak gebruikt als gastheercellen voor transformatie en plasmiden en bacteriofagen worden vaak gebruikt als vectoren in recombinant-DNA-technologie. Dit is het verschil tussen transformanten en recombinanten.
