Het belangrijkste verschil tussen kloneringsvector en expressievector is dat kloneringsvector een vreemd DNA-fragment in de gastheercel draagt, terwijl expressievector de expressie van genen in eiwitten vergemakkelijkt.
Vector is een belangrijke term in de moleculaire biologie. Bij recombinant-DNA-technologie is de belangrijkste rol van een vector het verschaffen van een wijze van transport naar een bruikbare DNA-fractie die in een gastheercel moet worden ingebracht. Bovendien is het een DNA-molecuul dat wordt gebruikt om een vreemd DNA-fragment kunstmatig in een gastheercel te dragen om tot expressie te worden gebracht of te worden gerepliceerd. De meest gebruikte vectoren zijn plasmiden, virale vectoren, cosmiden en kunstmatige chromosomen. Kloonvector en expressievector zijn twee soorten vectoren die geclassificeerd zijn op basis van hun toepassingen.
Wat is een kloonvector?
Een kloneringsvector is een DNA-fractie die kan worden gebruikt om een vreemd DNA-molecuul in te voegen en die in een gastheer kan worden ingebracht voor kloneringsdoeleinden. Een ideaal kenmerk van een kloneringsvector is gemakkelijke insertie/verwijdering van het DNA-fragment door behandeling met restrictie-enzymen en behandeling met ligerend enzym. In dit opzicht zijn vaak gebruikte kloneringsvectoren de genetisch gemanipuleerde plasmiden.
Figuur 01: Vector klonen
Een kloneringsvector moet een meervoudige kloneringsplaats, een selecteerbaar markergen en een reportergen hebben. Het doel van een kloonplaats is om een plaats te bieden waar het klonen kan plaatsvinden. Een selecteerbaar markergen helpt bij het identificeren van succesvolle recombinanten na klonering en een reportergen maakt screening en identificatie van de juiste recombinant onder de recombinanten na klonering mogelijk. De kloneringsvector helpt niet noodzakelijkerwijs om een eiwit tot expressie te brengen waarvoor het vreemde DNA codeert. Het enige doel van de kloneringsvector is dus om vreemd DNA naar de gastheer te dragen.
Wat is een expressievector?
Expressievector, ook wel expressieconstruct genoemd, is een type vector dat wordt gebruikt voor de expressie van eiwitten in de gastheercel. Zoals elke vector moet deze ook de belangrijkste delen een meervoudige kloneringsplaats, een markergen en een reportergen bevatten. De vector introduceert een nieuw gen in de gastheer en met behulp van het eiwitsynthesemechanisme van de gastheer kan het gen tot expressie worden gebracht in de gastheer. Bovendien is de initiële focus ervan om stabiel m-RNA te maken en daardoor eiwitten te maken. Een goed voorbeeld is de commerciële productie van insuline. Het insulinegen wordt geïntroduceerd in een bacterieel plasmide en terug ingebracht in E.coli-bacterielichaam, waardoor de plasmiden zich kunnen vermenigvuldigen en de E. coli kan groeien, waardoor insuline wordt afgescheiden die kan worden verzameld en gebruikt.
Figuur 02: Expressievector
Verder moet een expressievector een sterk promotorgebied, een correcte translatie-initiatiesequentie en een correct terminatorcodon en een sequentie hebben. Expressievectoren hebben talrijke toepassingen bij het produceren van peptiden en eiwitten voor de farmaceutische industrie, zoals het produceren van insuline, groeihormoon, antibiotica, vaccins, antilichamen. Bovendien helpen expressievectoren bij de productie van enzymen in de voedings- en kledingindustrie. Niet alleen dat, expressievectoren zijn essentieel bij het produceren van transgene planten zoals gouden rijst, insectenresistente planten, herbicide-resistente planten, enz.
Wat zijn de overeenkomsten tussen kloonvector en expressievector?
- Kloneringsvector en expressievector zijn twee soorten vectoren die we gebruiken in recombinant-DNA-technologie en genetische manipulatie.
- Beide bevatten een markergen en een reportergen.
- Bovendien bestaan ze uit meerdere kloonsites.
- Ze hebben ook een oorsprong van replicatie en het vermogen om zichzelf te repliceren.
Wat is het verschil tussen kloonvector en expressievector?
Een kloneringsvector is een klein DNA-molecuul dat een vreemd DNA-fragment in de gastheercel draagt, terwijl expressievector een type vector is dat de introductie, expressie van genen en productie van eiwitten vergemakkelijkt. Dit is dus het belangrijkste verschil tussen de kloneringsvector en de expressievector. Verder is een ander significant verschil tussen kloneringsvector en expressievector dat een kloneringsvector een vreemd DNA-fragment in een gastheer introduceert, terwijl expressievectoren het geïntroduceerde gen tot expressie brengen door het relevante eiwit te produceren.
Bovendien bestaat de kloneringsvector uit een replicatieoorsprong, restrictieplaatsen en een selecteerbare marker. Terwijl de expressievector enhancers, promotorregio, terminatiecodon, transcriptie-initiatiesequentie, een replicatieoorsprong, restrictieplaatsen en een selecteerbare marker bevat. Daarom is dit ook een verschil tussen kloneringsvector en expressievector. Bovendien zijn plasmiden, bacteriofagen, bacteriële kunstmatige chromosomen, cosmiden, kunstmatige zoogdierchromosomen, kunstmatige gistchromosomen, enz., voorbeelden van kloneringsvectoren. Ondertussen zijn expressievectoren meestal plasmiden.
Samenvatting – Vector klonen versus expressievector
Op basis van hun functie in de moleculaire biologie zijn er twee soorten vectoren als kloneringsvector en expressievector. Een kloneringsvector is een klein DNA-molecuul dat vreemd DNA in de gastheercel aflevert. Er zijn verschillende soorten kloneringsvectoren zoals plasmiden, bacteriofagen, bacteriële kunstmatige chromosomen, cosmiden en kunstmatige chromosomen van zoogdieren. Daarentegen is een expressievector een plasmide dat het gen van belang in de gastheercel introduceert en de genexpressie vergemakkelijkt om het eiwitproduct te verkrijgen. Expressievectoren zijn plasmiden. Dit is dus de samenvatting van het verschil tussen de kloneringsvector en de expressievector.
