Het belangrijkste verschil tussen ionenuitwisselings- en grootte-uitsluitingschromatografie is dat ionenuitwisselingschromatografie wordt gebruikt om ionische stoffen te analyseren op basis van de lading, terwijl grootte-uitsluitingschromatografie wordt gebruikt om grote moleculen te analyseren op basis van de grootte.
Chromatografie is een analytische techniek die kan worden gebruikt om verschillende mengsels te analyseren. De chromatografische technieken worden benoemd volgens de parameter die wordt gebruikt om de stoffen te analyseren - b.v. grootte-uitsluitingschromatografie, ionenuitwisselingschromatografie, enz.
Wat is ionenuitwisselingschromatografie?
Ionenuitwisselingschromatografie is een analytische techniek waarmee we ionische stoffen kunnen analyseren. Het is vaak nuttig om anorganische anionen en kationen (d.w.z. chloride- en nitraatanionen en kalium- en natriumkationen) te analyseren. Hoewel het geen veelgebruikte methode is, kunnen we er organische ionen mee analyseren. Bovendien kunnen we deze techniek gebruiken voor het zuiveren van eiwitten omdat eiwitten bij bepaalde pH-waarden geladen moleculen zijn. Hier gebruiken we een vaste stationaire fase waaraan de geladen deeltjes zich kunnen hechten. We kunnen bijvoorbeeld de harspolystyreen-divinylbenzeencopolymeren als vaste drager gebruiken.
Figuur 01: Theorie achter ionenuitwisselingschromatografie
Om dit verder uit te leggen, heeft de stationaire fase vaste ionen zoals sulfaatanionen of quaternaire aminekationen. Elk van deze zou moeten associëren met een tegenion (een ion met tegengestelde lading) als we de neutraliteit van dit systeem willen behouden. Als het tegenion een kation is, noemen we het systeem een kationenuitwisselingshars. Maar als het tegenion een anion is, is het systeem een anionenuitwisselingshars. Bovendien zijn er vijf belangrijke stappen in ionenuitwisselingschromatografie:
- Eerste fase
- Adsorptie van het doel
- Begin van elutie
- Einde van elutie
- Regeneratie
Wat is grootte-uitsluitingschromatografie?
Size-exclusiechromatografie of SEC is een analytische techniek waarbij moleculen in een mengsel kunnen worden gescheiden door hun grootte en molecuulgewicht. Meestal werkt het met grote moleculen die macromoleculen worden genoemd. Meestal wordt voor de analyse een waterige oplossing gebruikt. Dan wordt het de gelfiltratiechromatografie genoemd. Wanneer het een organisch oplosmiddel is, wordt het gelpermeatiechromatografie genoemd.
Gelfiltratiechromatografie is een vorm van grootte-uitsluitingschromatografie waarbij we een waterige oplossing als mobiele fase gebruiken. Daarom is de mobiele fase die we vaak gebruiken in deze techniek een waterige buffer. We gebruiken ook een chromatografische kolom voor deze scheiding en we moeten de kolom inpakken met poreuze kralen. Gewoonlijk zijn Sephadex en agarose bruikbaar als het poreuze materiaal. Vandaar dat dit materiaal de stationaire fase van ons experiment is. Bovendien kunnen we de poriegrootte van deze kralen gebruiken om de grootte te bepalen van macromoleculen die we scheiden. Het is echter slechts een schatting.
Figuur 02: Een apparaat voor grootte-uitsluitingschromatografie
Gelpermeatiechromatografie is een vorm van grootte-uitsluitingschromatografie waarbij we een organisch oplosmiddel als mobiele fase gebruiken. Daarom kunnen we hiervoor oplossingen als hexaan en tolueen gebruiken. De stationaire fase is een poreus materiaal, hetzelfde als bij gelfiltratiechromatografie. Deze techniek wordt vaak toegepast op polymeren en ander organisch oplosbaar materiaal. De werkingsmethode van de techniek is vergelijkbaar met die van gelfiltratiechromatografie.
Wat is het verschil tussen ionenuitwisseling en grootte-uitsluitingschromatografie?
Chromatografie is een analytische techniek die kan worden gebruikt om verschillende mengsels te analyseren. Het belangrijkste verschil tussen ionenuitwisselings- en grootte-uitsluitingschromatografie is dat ionenuitwisselingschromatografie wordt gebruikt om ionische stoffen te analyseren op basis van de lading, terwijl grootte-uitsluitingschromatografie wordt gebruikt om grote moleculen te analyseren op basis van de grootte.
Hieronder infographic geeft meer informatie over het verschil tussen ionenuitwisselingschromatografie en grootte-uitsluitingschromatografie.
Samenvatting – Ionenuitwisseling versus grootte-uitsluitingschromatografie
Chromatografie is een analytische techniek die kan worden gebruikt om verschillende mengsels te analyseren. Het belangrijkste verschil tussen ionenuitwisselings- en grootte-uitsluitingschromatografie is dat ionenuitwisselingschromatografie wordt gebruikt om ionische stoffen te analyseren op basis van de lading, terwijl grootte-uitsluitingschromatografie wordt gebruikt om grote moleculen te analyseren op basis van de grootte.
