Het belangrijkste verschil tussen chromosoombanding en chromosoomschildering is dat chromosoombanding een kleuringstechniek is die regio's van chromosomen in te onderscheiden donkere en lichte banden weergeeft, maar chromosoomkleuring is een hybridisatietechniek waarbij specifieke regio's of segmenten van chromosomen geverfd met sequentie-specifieke fluorescent gelabelde sondes.
In de cytogenetica is het noodzakelijk om een zichtbaar karyotype van een organisme te produceren om chromosomen en hun afwijkingen te identificeren. Chromosoombanding en chromosoomschildering zijn twee cytogenetische technieken die helpen bij het visualiseren van chromosomen. Beide technieken zijn nuttig bij het identificeren van genetische aandoeningen.
Wat is chromosoombanding?
Chromosoombanding is een kleuringstechniek waarbij afwisselend lichte en donkere banden of gebieden langs de lengte van een chromosoom worden weergegeven. Een band verwijst naar een deel van een chromosoom dat duidelijk te onderscheiden is van de aangrenzende segmenten door er donkerder of lichter uit te zien. Om donkere en lichte banden te produceren, is het noodzakelijk om de chromosomen te kleuren met een geschikte kleurstof zoals fluorescerende kleurstof quinacrine of Giemsa-kleuring.
Er zijn verschillende soorten chromosomale banding-technieken. Onder hen zijn Q-banding, Reverse (R) banding en G-banding algemene bandingtechnieken. G-bandingtechniek maakt gebruik van een vlek genaamd Giemsa-vlek, en het kleurt AT-rijke gebieden van heterochromatische gebieden in donker gekleurde banden en GC-rijke euchromatische gebieden in licht gekleurde banden. R-banding is het omgekeerde van G-banding en kleurt GC-rijke gebieden in donkere banden en AT-rijke gebieden in lichte banden. Q-banding daarentegen maakt gebruik van fluorescerende kleurstof quinacrine en kleurt chromosomen in een gele fluorescentie van verschillende intensiteit. C-bandtechniek is een andere bandtechniek die centromeergebieden kleurt. Bovendien visualiseert de T-bandtechniek telomere regio's.
Figuur 01: Chromosoombanding
Het strepenpatroon is uniek voor organismen. Daarom zijn deze unieke bandpatronen belangrijk bij het identificeren van chromosomen en het detecteren van chromosoomafwijkingen (chromosoombreuk, verlies, duplicatie, translocatie of omgekeerde segmenten).
Wat is chromosoom schilderen?
Chromosoomverf is een techniek waarbij specifieke regio's of segmenten van chromosomen worden geverfd met sequentiespecifieke probes die fluorescerend zijn gelabeld. Daarom gaat chromosomaal schilderen altijd gepaard met in situ FISH-techniek. Het is volledig gebaseerd op de moleculaire hybridisatie met sequentiespecifieke probes op chromosomen. Daarom heeft het specifieke sondes nodig om de doelwitchromosomen of chromosoomgebieden te hybridiseren.
Figuur 02: Chromosomaal schilderij
Bovendien vereist deze techniek in eerste instantie de denaturatie van het chromosomale doelwit-DNA dat zich in de metafase bevindt. Ten tweede vindt de hybridisatiestap plaats met probes. Zodra probes hun complementaire sequenties vinden, hybridiseren ze met de specifieke regio's van het chromosoom. We kunnen de gehybridiseerde sites gemakkelijk observeren met behulp van autoradiografie of immunofluorescentie. Voorbereiding van sondes, denaturatie, hybridisatie en visualisatie zijn de vier belangrijkste stappen die betrokken zijn bij chromosomaal schilderen.
Wat toepassingen betreft, is chromosomaal schilderen nuttig bij het identificeren van chromosomale herschikkingen, breekpunten en bij de bepaling van extrachromosomale materialen. Bovendien is het een krachtig hulpmiddel bij de exacte lokalisatie van verschillende gensequenties van chromosomen op microscopisch niveau. Bovendien is chromosomaal schilderen nuttig bij het identificeren van genen voor gewenste karakters in de chromosomen.
Wat zijn de overeenkomsten tussen chromosoombanding en chromosoomverf?
- Chromosoombanding en chromosoomschildering zijn twee technieken die worden gebruikt in de cytogenetische analyse.
- Beide technieken visualiseren chromosomen meestal in metafase.
- Deze technieken kunnen normale chromosomen en afwijkingen identificeren.
- Bovendien zijn deze technieken erg nuttig bij het identificeren van genetische aandoeningen.
Wat is het verschil tussen chromosoombanding en chromosoomverf?
Chromosoombanding is een kleuringstechniek waarbij delen van chromosomen worden weergegeven in donkere en lichte banden, die te onderscheiden zijn. Ondertussen is chromosoomschildering een hybridisatietechniek die specifieke regio's van chromosomen schildert met sequentiespecifieke probes die fluorescerend zijn gelabeld. Dit is dus het belangrijkste verschil tussen chromosoombanding en chromosoomschildering. Bovendien produceert chromosoombanding afwisselend donkere en lichte banden langs de lengte van het chromosoom, terwijl chromosoomverf fluorescerend gelabelde gebieden van chromosomen produceert.
Bovendien hangt chromosoombanding af van het vermogen van het chromosomale DNA om te kleuren met een kleurstof, terwijl chromosoomkleuring afhangt van de moleculaire hybridisatie met sequentiespecifieke probes op chromosomen. Dit is een belangrijk verschil tussen chromosoombanding en chromosoomschildering. Daarnaast vereist chromosoomverftechniek, in tegenstelling tot chromosoombanding, sequentiespecifieke fluorescent gelabelde sondes.
Samenvatting – Chromosoombanding versus chromosoomverf
Chromosoombanding en chromosoomschildering zijn twee technieken die worden gebruikt om chromosomen te visualiseren, meestal in metafase. Beide technieken helpen bij het identificeren van numerieke en structurele chromosomale afwijkingen en genetische ziekten. Chromosoombanding is een kleuringstechniek die specifieke gebieden van chromosomen in donkere en lichte banden weergeeft, die te onderscheiden zijn. Ondertussen is chromosomaal schilderen een soort hybridisatietechniek die specifieke regio's van chromosomen visualiseert vanwege de hybridisatie met fluorescent gelabelde sequentiespecifieke probes. Dit is dus het belangrijkste verschil tussen chromosoombanding en chromosoomschildering.
