Het belangrijkste verschil tussen pBR322 en pUC19 is dat pBR322 een plasmidevector is met een lengte van 4361 basenparen, terwijl pUC19 een plasmidevector is met een lengte van 2686 basenparen.
Een kloneringsvector is een klein stukje DNA dat stabiel in een organisme kan worden gehouden. Het is ook een klein stukje DNA waarin een vreemd DNA-fragment kan worden ingebracht voor kloneringsdoeleinden. Een vector bevat belangrijke kenmerken die de gemakkelijke insertie van een vreemd DNA-fragment in vectoren mogelijk maken, zoals restrictieplaatsen, een selecteerbare marker, reportergen en expressie-element. Klonen werd voor het eerst uitgevoerd met behulp van E.coli. Kloneringsvectoren voor E. coli omvatten plasmiden, bacteriofagen, cosmiden en bacteriële kunstmatige chromosomen (BAC). De meest gebruikte vectoren zijn genetisch gemanipuleerde plasmiden. pBR322 en pUC19 zijn twee typen plasmidevectoren.
Wat is pBR322?
pBR322 is een plasmidevector. Het is een van de eerste veelgebruikte kloneringsvectoren voor E. coli. Deze vector werd voor het eerst gemaakt in 1977 in het laboratorium van Herbert Boyer aan de Universiteit van Californië, San Francisco. Het is een circulair dubbelstrengs DNA met een lengte van 4361 basenparen.
Figuur 01: pBR322
Deze plasmidevector heeft speciale eigenschappen. Normaal gesproken heeft het twee antibioticaresistentiegenen: gen bla dat codeert voor het eiwit ampicillineresistentie (AmpR) en gen tetA dat codeert voor tetracyclineresistentie (TetR) eiwit. Bovendien bevat het de oorsprong van de replicatie van pMB1. Deze plasmidevector heeft ook een rop-gen dat codeert voor een restrictor van het aantal kopieën van het plasmide. Verder heeft deze vector unieke restrictieplaatsen voor meer dan 40 restrictie-enzymen. Elf van die veertig restrictieplaatsen liggen binnen TetR gene. Er zijn twee restrictieplaatsen voor restrictie-enzymen HindIII en ClaI binnen de promotor van het TetRgen. Verder zijn er zes zeer belangrijke restrictieplaatsen binnen het AmpR-gen. pBR322 is een kloneringsvector met een laag aantal kopieën. Het levert ongeveer 20 plasmide-kopieën per bacteriële cel op. Het molecuulgewicht van de vector is 2,83×106 d altons.
Wat is pUC19?
pUC19 is een plasmidevector met een lengte van 2686 basenparen. Het is een van de reeksen plasmidevectoren die zijn gemaakt door Joachim Messing en collega's. Het vroege werk aan deze plasmidereeks werd uitgevoerd aan de Universiteit van Californië. Het is een circulair dubbelstrengs DNA.
Figuur 02: pUC19
Deze plasmidevector bevat ook belangrijke kenmerken. Het heeft een N-terminaal fragment van het β-glactosidase (lacz) -gen. Het heeft ook een gebied met meerdere kloneringsplaatsen (MCS). Dit gebied is gesplitst in codons 6 en 7 van het lacz-gen. Het MCS-gebied verschaft veel restrictie-endonucleasen-restrictieplaatsen. Naast het -glactosidase-gen codeert pUC19 ook voor een ampicillineresistentiegen (AmpR). Bovendien is de oorsprong van replicatie afgeleid van plasmide pMB1. Hoewel pUC19 klein van formaat is, heeft het een hoog aantal kopieën (500-700 kopieën per bacteriële cel). Het molecuulgewicht van deze plasmidevector is 1,75×106 d altons.
Wat zijn de overeenkomsten tussen pBR322 en pUC19?
- pBR322 en pUC19 zijn twee soorten plasmidevectoren.
- Het zijn populaire kloonvectoren voor coli.
- Beide plasmidevectoren hebben dezelfde replicatieoorsprong als plasmide pMB1.
- Deze vectoren hebben meerdere restrictieplaatsen.
- Beide plasmidevectoren hebben een ampicillineresistentiegen als selecteerbare marker.
Wat is het verschil tussen pBR322 en pUC19?
pBR322 is een plasmidevector met een lengte van 4361 basenparen, terwijl pUC19 een plasmidevector is met een lengte van 2686 basenparen. Dit is dus het belangrijkste verschil tussen pBR322 en pUC19. Bovendien is pBR322 een plasmidevector met een laag aantal kopieën, terwijl pUC19 een plasmidevector met een hoog aantal kopieën is.
De onderstaande infographic presenteert de verschillen tussen pBR322 en pUC19 in tabelvorm voor vergelijking naast elkaar.
Samenvatting – pBR322 vs pUC19
De meest gebruikte kloneringsvectoren voor E.coli zijn genetisch gemanipuleerde plasmiden.pBR322 en pUC19 zijn twee typen plasmidevectoren. pBR322 is een plasmidevector met een lengte van 4361 basenparen, terwijl pUC19 een plasmidevector is met een lengte van 2686 basenparen. Dit is dus het belangrijkste verschil tussen pBR322 en pUC19.
